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WEHI-164
Disease
Fibrossarcoma
Synonyms
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

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WEHI-164

Cell line · Product number 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

A linhagem celular WEHI-164 foi originalmente estabelecida a partir de um fibrossarcoma que se desenvolveu em um camundongo BALB/c após injeções subcutâneas de 3-metilcolantreno. Essa linhagem celular é derivada de tecido mesenquimal e apresenta características típicas de células do tipo fibroblasto. A WEHI-164 tem sido uma ferramenta essencial no estudo do câncer, proporcionando insights especialmente nos campos da imunologia tumoral e dos mecanismos celulares da apoptose.

As células WEHI-164 são especialmente valorizadas na pesquisa devido à sua responsividade à apoptose induzida por citocinas, o que as torna um importante modelo para o estudo da interação entre citocinas e células cancerosas. Essa sensibilidade a citocinas como o fator de necrose tumoral (TNF) e o TRAIL (ligante indutor de apoptose relacionado ao TNF) posiciona a linhagem celular WEHI-164 como um recurso útil para explorar vias de sinalização que medeiam a morte celular e para a triagem de potenciais terapias anticâncer que possam manipular essas vias. Além disso, as propriedades semelhantes às dos fibroblastos da linha celular permitem estudos sobre morfologia celular, características de crescimento e o microambiente tumoral, proporcionando uma compreensão mais abrangente da dinâmica tumoral e das interações dentro da matriz celular.

Apesar de seu amplo uso em pesquisas, a linhagem celular WEHI-164 apresenta várias aberrações cromossômicas, o que é comum entre células transformadas por carcinogênese química. Essas instabilidades genéticas são cruciais para estudos focados em compreender como as variações genéticas podem influenciar a progressão do câncer e a resposta aos tratamentos. O uso contínuo da WEHI-164 em diversos contextos de pesquisa ressalta sua utilidade no avanço do conhecimento sobre a biologia do câncer e no desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas.

Disease
Fibrossarcoma
Synonyms
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Semelhante a fibroblastos
Cell type
Fibroblasto
Tumourigenic
Sim, em camundongos Balb/c

04Identifiers

Citation
WEHI-164 (número de catálogo da Cytion 400438)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 x 104 células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se fixem por pelo menos 48 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c