Премини към съдържанието
WEHI-164
Заболяване
Фибросарком
Синоними
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Документи

WEHI-164

Cell line · Номер на продукта 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия WEHI-164 първоначално е създадена от фибросарком, развил се при BALB/c мишка след подкожно инжектиране на 3-метилхолантрен. Тази клетъчна линия произхожда от мезенхимна тъкан и демонстрира характеристики, типични за фибробластоподобните клетки. WEHI-164 е изключително важен инструмент за изучаване на рака, като предоставя информация, особено в областта на туморната имунология и клетъчните механизми на апоптозата.

Клетките WEHI-164 са особено ценени в изследванията поради тяхната отзивчивост към апоптоза, предизвикана от цитокини, което ги прави важен модел за изучаване на взаимодействието между цитокини и ракови клетки. Тази чувствителност към цитокини като тумор некротизиращ фактор (TNF) и TRAIL (TNF-свързан лиганд, индуциращ апоптоза) поставя клетъчната линия WEHI-164 като полезен ресурс за изследване на сигналните пътища, които медиират клетъчната смърт, и за скрининг на потенциални противоракови терапии, които могат да манипулират тези пътища. Освен това фибробластоподобните свойства на клетъчната линия позволяват изследвания на клетъчната морфология, характеристиките на растежа и туморната микросреда, което осигурява по-цялостно разбиране на динамиката на тумора и взаимодействията в клетъчния матрикс.

Въпреки широкото си използване в изследванията, клетъчната линия WEHI-164 показва няколко хромозомни аберации, което е често срещано сред клетките, трансформирани от химическа канцерогенеза. Тези генетични нестабилности са от решаващо значение за изследванията, насочени към разбирането на това как генетичните вариации могат да повлияят на прогресията на рака и отговора към лечението. Продължаващото използване на WEHI-164 в различни изследователски комплекси подчертава неговата полезност за разширяване на познанията за биологията на рака и за разработването на нови терапевтични подходи.

Заболяване
Фибросарком
Синоними
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Класификация

Организъм
Мишка
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти
Тип клетка
Фибробласти
Туморогенен
Да, при мишки Balb/c

04Идентификатори

Източник
WEHI-164 (каталожен номер 400438 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_2251

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, разположете клетките на 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за поне 48 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
BALB/c