Siirry sisältöön
WEHI-164
Sairaus
Fibrosarkooma
Synonyymit
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Asiakirjat

WEHI-164

Cell line · Tuotenumero 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

WEHI-164-solulinja perustettiin alun perin fibrosarkoomasta, joka kehittyi BALB/c-hiirelle 3-metyylikolantreenin ihonalaisen injektion jälkeen. Tämä solulinja on peräisin mesenkymaalisesta kudoksesta, ja sillä on fibroblastien kaltaisille soluille tyypillisiä ominaisuuksia. WEHI-164 on ollut tärkeä väline syövän tutkimuksessa, ja se on tarjonnut tietoa erityisesti kasvainten immunologiasta ja apoptoosin solumekanismeista.

WEHI-164-soluja arvostetaan tutkimuksessa erityisesti siksi, että ne reagoivat herkästi sytokiinien aiheuttamaan apoptoosiin, mikä tekee niistä tärkeän mallin sytokiinien ja syöpäsolujen välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen. Herkkyys sytokiineille, kuten tuumorinekroositekijälle (TNF) ja TRAIL:lle (TNF:ään liittyvä apoptoosia indusoiva ligandi), tekee WEHI-164-solulinjasta hyödyllisen resurssin solukuolemaa välittävien signaalireittien tutkimiseen ja sellaisten mahdollisten syöpähoitojen seulontaan, jotka voisivat manipuloida näitä reittejä. Lisäksi solulinjan fibroblastin kaltaiset ominaisuudet mahdollistavat solujen morfologian, kasvuominaisuuksien ja kasvaimen mikroympäristön tutkimisen, mikä antaa kattavamman käsityksen kasvaimen dynamiikasta ja vuorovaikutuksesta solumatriisissa.

Vaikka WEHI-164-solulinjaa käytetään laajasti tutkimuksessa, sillä on useita kromosomipoikkeavuuksia, mikä on yleistä kemiallisessa karsinogeneesissä muuntuneissa soluissa. Nämä geneettiset epävakaudet ovat ratkaisevan tärkeitä tutkimuksissa, joissa keskitytään ymmärtämään, miten geneettiset muunnokset voivat vaikuttaa syövän etenemiseen ja vasteeseen hoitoihin. WEHI-164:n jatkuva käyttö erilaisissa tutkimusasetelmissa korostaa sen hyödyllisyyttä syövän biologian tuntemuksen edistämisessä ja uusien terapeuttisten lähestymistapojen kehittämisessä.

Sairaus
Fibrosarkooma
Synonyymit
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, Balb/c-hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
WEHI-164 (Cytionin luettelonumero 400438)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c