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WEHI-164
Enfermedad
Fibrosarcoma
Sinónimos
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Documentos

WEHI-164

Cell line · Número de producto 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

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01Información general

Descripción

La línea celular WEHI-164 se estableció originalmente a partir de un fibrosarcoma que se desarrolló en un ratón BALB/c tras inyecciones subcutáneas de 3-metilcolantreno. Esta línea celular procede de tejido mesenquimal y presenta características típicas de las células de tipo fibroblasto. WEHI-164 ha sido una herramienta fundamental en el estudio del cáncer, aportando conocimientos especialmente en los campos de la inmunología tumoral y los mecanismos celulares de la apoptosis.

Las células WEHI-164 son especialmente valoradas en investigación por su capacidad de respuesta a la apoptosis inducida por citocinas, lo que las convierte en un modelo importante para estudiar la interacción entre citocinas y células cancerosas. Esta sensibilidad a citocinas como el factor de necrosis tumoral (TNF) y TRAIL (ligando inductor de la apoptosis relacionado con el TNF) sitúa a la línea celular WEHI-164 como un recurso útil para explorar las vías de señalización que median en la muerte celular y para el cribado de posibles terapias anticancerígenas que pudieran manipular estas vías. Además, las propiedades similares a las de los fibroblastos de la línea celular permiten estudiar la morfología celular, las características de crecimiento y el microentorno tumoral, lo que proporciona una comprensión más completa de la dinámica tumoral y las interacciones dentro de la matriz celular.

A pesar de su amplio uso en investigación, la línea celular WEHI-164 presenta varias aberraciones cromosómicas, lo que es común entre las células transformadas por carcinogénesis química. Estas inestabilidades genéticas son cruciales para los estudios centrados en comprender cómo las variaciones genéticas pueden influir en la progresión del cáncer y en la respuesta a los tratamientos. El uso continuado de WEHI-164 en diversos montajes de investigación subraya su utilidad para avanzar en el conocimiento de la biología del cáncer y en el desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos.

Enfermedad
Fibrosarcoma
Sinónimos
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Clasificación

Organismo
Ratón
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Fibroblastos
Tumorigénico
Sí, en ratones Balb/c

04Identificadores

Referencia
WEHI-164 (número de catálogo de Cytion 400438)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 48 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Raza / subespecie
BALB/c