İçeriğe atla
WEHI-164
Hastalık
Fibrosarkom
Eş anlamlılar
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

WEHI-164

Cell line · Ürün numarası 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

WEHI-164 hücre hattı ilk olarak 3-metilkolantrenin subkutan enjeksiyonlarını takiben BALB/c faresinde gelişen bir fibrosarkomdan oluşturulmuştur. Bu hücre hattı mezenkimal dokudan türetilmiştir ve fibroblast benzeri hücrelerin tipik özelliklerini gösterir. WEHI-164, özellikle tümör immünolojisi ve apoptozun hücresel mekanizmaları alanlarında içgörüler sağlayarak kanser çalışmalarında kritik bir araç olmuştur.

WEHI-164 hücreleri, sitokin kaynaklı apoptoza duyarlı olmaları nedeniyle araştırmalarda özellikle değerlidir ve bu da onları sitokinler ile kanser hücreleri arasındaki etkileşimi incelemek için önemli bir model haline getirmektedir. Tümör nekroz faktörü (TNF) ve TRAIL (TNF ile ilişkili apoptozu indükleyen ligand) gibi sitokinlere karşı bu duyarlılık, WEHI-164 hücre hattını hücre ölümüne aracılık eden sinyal yollarını keşfetmek ve bu yolları manipüle edebilecek potansiyel antikanser tedavilerini taramak için yararlı bir kaynak olarak konumlandırmaktadır. Ayrıca, hücre hattının fibroblast benzeri özellikleri hücre morfolojisi, büyüme özellikleri ve tümör mikroçevresi üzerine çalışmalara olanak tanıyarak tümör dinamikleri ve hücresel matris içindeki etkileşimlerin daha kapsamlı bir şekilde anlaşılmasını sağlar.

Araştırmalarda yaygın olarak kullanılmasına rağmen, WEHI-164 hücre hattı, kimyasal karsinogenez ile dönüştürülen hücreler arasında yaygın olan çeşitli kromozomal sapmalar sergilemektedir. Bu genetik dengesizlikler, genetik varyasyonların kanser ilerlemesini ve tedavilere yanıtı nasıl etkileyebileceğini anlamaya odaklanan çalışmalar için çok önemlidir. WEHI-164'ün çeşitli araştırma düzeneklerinde devam eden kullanımı, kanser biyolojisi bilgisinin ilerletilmesinde ve yeni terapötik yaklaşımların geliştirilmesindeki faydasının altını çizmektedir.

Hastalık
Fibrosarkom
Eş anlamlılar
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Hücre türü
Fibroblast
Tümör oluşturucu
Evet, Balb/c farelerinde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
WEHI-164 (Cytion katalog numarası 400438)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 48 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c