Přejít na obsah
WEHI-164
Nemoc
Fibrosarkom
Synonyma
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Dokumenty

WEHI-164

Cell line · Číslo výrobku 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie WEHI-164 byla původně vytvořena z fibrosarkomu, který se vyvinul u myši BALB/c po subkutánní injekci 3-methylcholanthrenu. Tato buněčná linie je odvozena z mezenchymální tkáně a vykazuje vlastnosti typické pro buňky podobné fibroblastům. WEHI-164 se stala důležitým nástrojem při studiu nádorových onemocnění a poskytla poznatky zejména v oblasti nádorové imunologie a buněčných mechanismů apoptózy.

Buňky WEHI-164 jsou ve výzkumu ceněny zejména díky své citlivosti na apoptózu vyvolanou cytokiny, což z nich činí důležitý model pro studium interakce mezi cytokiny a nádorovými buňkami. Tato citlivost na cytokiny, jako je TNF (tumor necrosis factor) a TRAIL (TNF-related apoptosis-inducing ligand), staví buněčnou linii WEHI-164 do pozice užitečného zdroje pro zkoumání signálních drah, které zprostředkovávají buněčnou smrt, a pro screening potenciálních protinádorových terapií, které by mohly tyto dráhy manipulovat. Navíc vlastnosti buněčné linie podobné fibroblastům umožňují studovat morfologii buněk, růstové charakteristiky a nádorové mikroprostředí, což umožňuje komplexnější pochopení dynamiky nádoru a interakcí v buněčné matrix.

Navzdory svému rozsáhlému využití ve výzkumu vykazuje buněčná linie WEHI-164 několik chromozomálních aberací, což je u buněk transformovaných chemickou karcinogenezí běžné. Tyto genetické nestability mají zásadní význam pro studie zaměřené na pochopení toho, jak mohou genetické odchylky ovlivnit progresi rakoviny a odpověď na léčbu. Současné využívání WEHI-164 v různých výzkumných sestavách podtrhuje její užitečnost pro prohloubení znalostí biologie rakoviny a pro vývoj nových terapeutických přístupů.

Nemoc
Fibrosarkom
Synonyma
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Klasifikace

Organismus
Myš
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Typ buňky
Fibroblasty
Tumorogenní
Ano, u myší Balb/c

04Identifikátory

Citace
WEHI-164 (katalogové číslo Cytion 400438)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 48 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c