Preskoči na vsebino
WEHI-164
Bolezen
Fibrosarkom
Sinonimi
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Dokumenti

WEHI-164

Cell line · Številka izdelka 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija WEHI-164 je bila prvotno ustvarjena iz fibrosarkoma, ki se je razvil pri miši BALB/c po podkožnih injekcijah 3-metilholantrena. Ta celična linija izhaja iz mezenhimskega tkiva in ima značilnosti, značilne za fibroblastom podobne celice. WEHI-164 je bilo ključno orodje pri preučevanju raka, saj je omogočilo vpogled zlasti v imunologijo tumorjev in celične mehanizme apoptoze.

Celice WEHI-164 so v raziskavah še posebej cenjene zaradi svoje odzivnosti na apoptozo, ki jo povzročajo citokini, zato so pomemben model za preučevanje interakcije med citokini in rakavimi celicami. Zaradi te občutljivosti na citokine, kot sta faktor tumorske nekroze (TNF) in TRAIL (ligand, ki povzroča apoptozo, povezano s TNF), je celična linija WEHI-164 uporaben vir za raziskovanje signalnih poti, ki posredujejo pri celični smrti, in za preverjanje potencialnih protirakavih terapij, ki bi lahko manipulirale s temi potmi. Poleg tega lastnosti celične linije, podobne fibroblastom, omogočajo študije morfologije celic, značilnosti rasti in tumorskega mikrookolja, kar omogoča celovitejše razumevanje dinamike tumorja in interakcij znotraj celičnega matriksa.

Kljub široki uporabi v raziskavah ima celična linija WEHI-164 več kromosomskih aberacij, kar je značilno za celice, spremenjene zaradi kemične karcinogeneze. Te genetske nestabilnosti so ključne za študije, ki se osredotočajo na razumevanje, kako lahko genetske variacije vplivajo na napredovanje raka in odziv na zdravljenje. Stalna uporaba WEHI-164 v različnih raziskovalnih sestavih poudarja njeno uporabnost pri poglabljanju znanja o biologiji raka in razvoju novih terapevtskih pristopov.

Bolezen
Fibrosarkom
Sinonimi
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Vrsta celice
Fibroblast
Tumorigeničen
Da, pri miših Balb/c

04Identifikatorji

Navajanje vira
WEHI-164 (kataloška številka Cytion 400438)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo za najmanj 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c