Pāriet uz saturu
WEHI-164
Slimība
Fibrosarkoma
Sinonīmi
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Dokumenti

WEHI-164

Cell line · Preces numurs 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

WEHI-164 šūnu līnija sākotnēji tika izveidota no fibrosarkomas, kas attīstījās BALB/c pelēm pēc 3-metilholantrēna zemādas injekcijām. Šī šūnu līnija ir iegūta no mezenhīma audiem, un tai piemīt fibroblastiem līdzīgām šūnām raksturīgas īpašības. WEHI-164 ir bijis ļoti svarīgs instruments vēža izpētē, jo īpaši sniedzot ieskatu audzēju imunoloģijas un apoptozes šūnu mehānismu jomā.

WEHI-164 šūnas ir īpaši novērtētas pētījumos, jo tās ir jutīgas pret citokīnu izraisītu apoptozi, padarot tās par svarīgu modeli citokīnu un vēža šūnu mijiedarbības izpētei. Šī jutība pret tādiem citokīniem kā audzēja nekrozes faktors (TNF) un TRAIL (ar TNF saistītais apoptozi inducējošais ligands) padara WEHI-164 šūnu līniju par noderīgu resursu, lai pētītu signālu ceļus, kas mediē šūnu nāvi, un lai pārbaudītu potenciālās pretvēža terapijas, kas varētu manipulēt ar šiem ceļiem. Turklāt šīs šūnu līnijas fibroblastiem līdzīgās īpašības ļauj pētīt šūnu morfoloģiju, augšanas īpašības un audzēja mikrovidi, nodrošinot plašāku izpratni par audzēja dinamiku un mijiedarbību šūnu matricā.

Neraugoties uz tās plašo izmantošanu pētniecībā, WEHI-164 šūnu līnijai ir vairākas hromosomu aberācijas, kas ir raksturīgas šūnām, kuras pārveidotas ķīmiskas kancerogēnas rezultātā. Šīs ģenētiskās nestabilitātes ir ļoti svarīgas pētījumos, kas vērsti uz izpratni par to, kā ģenētiskās variācijas var ietekmēt vēža progresēšanu un reakciju uz ārstēšanu. WEHI-164 pastāvīga izmantošana dažādās pētniecības sistēmās uzsver tās lietderību vēža bioloģijas zināšanu padziļināšanā un jaunu terapeitisko pieeju izstrādē.

Slimība
Fibrosarkoma
Sinonīmi
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti
Tumorogēns
Jā, Balb/c pelēm

04Identifikatori

Atsauce
WEHI-164 (Cytion kataloga numurs 400438)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c