Mine otse sisu juurde
WEHI-164
Haigus
Fibrosarkoom
Sünonüümid
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Dokumendid

WEHI-164

Cell line · Toote number 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

WEHI-164 rakuliin loodi algselt fibrosarkoomist, mis tekkis BALB/c hiirel pärast 3-metüülkolantreeni nahaalust süstimist. See rakuliin on saadud mesenhümaalsest koest ja sellel on fibroblastilaadsetele rakkudele iseloomulikud omadused. WEHI-164 on olnud oluline vahend vähktõve uurimisel, andes teadmisi eelkõige kasvaja immunoloogia ja apoptoosi rakumehhanismide kohta.

WEHI-164 rakke hinnatakse teadusuuringutes eriti kõrgelt nende tundlikkuse tõttu tsütokiinide poolt esilekutsutud apoptoosile, mis teeb neist olulise mudeli tsütokiinide ja vähirakkude vahelise koostoime uurimiseks. WEHI-164 rakuliin on tänu oma tundlikkusele selliste tsütokiinide suhtes nagu tuumornekroosifaktor (TNF) ja TRAIL (TNF-ga seotud apoptoosi indutseeriv ligand) kasulik ressurss rakusurma vahendavate signaaliradade uurimiseks ja võimalike vähivastaste ravimeetodite skriininguks, mis võiksid neid radasid manipuleerida. Lisaks võimaldavad rakuliini fibroblastilaadsed omadused uurida rakkude morfoloogiat, kasvuomadusi ja kasvaja mikrokeskkonda, mis võimaldab paremini mõista kasvaja dünaamikat ja rakumatrixis toimuvaid vastastikmõjusid.

Hoolimata selle ulatuslikust kasutamisest teadusuuringutes on WEHI-164 rakuliinil mitmeid kromosoomaberratsioone, mis on keemilise kantserogeneesi käigus muundunud rakkude puhul tavaline. Need geneetilised ebastabiilsused on olulised uuringutes, mis keskenduvad arusaamisele, kuidas geneetilised variatsioonid võivad mõjutada vähi progresseerumist ja ravile reageerimist. WEHI-164 jätkuv kasutamine erinevates uuringurühmades rõhutab selle kasulikkust vähi bioloogia tundmaõppimisel ja uute ravimeetodite väljatöötamisel.

Haigus
Fibrosarkoom
Sünonüümid
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide
Tuumorigeenne
Jah, Balb/c hiirtel

04Tunnused

Viide
WEHI-164 (Cytioni katalooginumber 400438)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c