Skip to content
WEHI-164
Disease
ไฟโบรซาร์โคมา
Synonyms
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Documents

WEHI-164

Cell line · Product number 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ WEHI-164 ถูกสร้างขึ้นครั้งแรกจากไฟโบรซาร์โคมาที่พัฒนาในหนู BALB/c หลังจากการฉีด 3-เมทิลโคลันเธนใต้ผิวหนัง สายเซลล์นี้มาจากเนื้อเยื่อเมเซนไคม์และมีลักษณะเฉพาะของเซลล์คล้ายไฟโบรบลาสต์ WEHI-164 เป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษาโรคมะเร็ง โดยให้ข้อมูลเชิงลึกโดยเฉพาะในด้านภูมิคุ้มกันของเนื้องอกและกลไกการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส

เซลล์ WEHI-164 มีคุณค่าอย่างยิ่งในงานวิจัยเนื่องจากมีความไวต่อการตายของเซลล์ที่เกิดจากไซโตไคน์ ทำให้เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างไซโตไคน์กับเซลล์มะเร็งความไวต่อไซโตไคน์ เช่น ทูเมอร์เนโครซิสแฟคเตอร์ (TNF) และ TRAIL (TNF-related apoptosis-inducing ligand) ทำให้เซลล์ไลน์ WEHI-164 เป็นทรัพยากรที่มีประโยชน์สำหรับการสำรวจเส้นทางการส่งสัญญาณที่ควบคุมการตายของเซลล์ และสำหรับการคัดกรองการรักษาโรคมะเร็งที่อาจปรับเปลี่ยนเส้นทางการส่งสัญญาณเหล่านี้ได้นอกจากนี้ คุณสมบัติคล้ายไฟโบรบลาสต์ของสายเซลล์นี้ยังเอื้อต่อการศึกษาเกี่ยวกับรูปร่างของเซลล์ ลักษณะการเจริญเติบโต และสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอก ซึ่งช่วยให้เข้าใจพลวัตของเนื้องอกและปฏิสัมพันธ์ภายในเมทริกซ์ของเซลล์ได้อย่างครอบคลุมมากขึ้น

แม้ว่าจะมีการใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัย แต่สายเซลล์ WEHI-164 แสดงให้เห็นถึงความผิดปกติของโครโมโซมหลายประการ ซึ่งเป็นเรื่องปกติในเซลล์ที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดยสารก่อมะเร็งทางเคมี ความไม่เสถียรทางพันธุกรรมเหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการศึกษาที่มุ่งเน้นความเข้าใจว่าความแปรผันทางพันธุกรรมสามารถส่งผลต่อการพัฒนาของมะเร็งและการตอบสนองต่อการรักษาได้อย่างไร การใช้ WEHI-164 อย่างต่อเนื่องในการวิจัยต่างๆ เน้นย้ำถึงประโยชน์ของมันในการพัฒนาความรู้เกี่ยวกับชีววิทยาของมะเร็งและการพัฒนาแนวทางการรักษาใหม่ๆ

Disease
ไฟโบรซาร์โคมา
Synonyms
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ใช่ ในหนู Balb/c

04Identifiers

Citation
WEHI-164 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400438)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์/ซม. และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c