Przejdź do treści
WEHI-164
Choroba
Włókniakomięsak
Synonimy
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Dokumenty

WEHI-164

Cell line · Numer produktu 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa WEHI-164 została pierwotnie utworzona z włókniakomięsaka, który rozwinął się u myszy BALB/c po podskórnym wstrzyknięciu 3-metylocholantrenu. Ta linia komórkowa pochodzi z tkanki mezenchymalnej i wykazuje cechy typowe dla komórek fibroblastopodobnych. WEHI-164 jest kluczowym narzędziem w badaniach nad rakiem, zapewniając wgląd zwłaszcza w immunologię nowotworów i komórkowe mechanizmy apoptozy.

Komórki WEHI-164 są szczególnie cenione w badaniach ze względu na ich wrażliwość na apoptozę indukowaną cytokinami, co czyni je ważnym modelem do badania interakcji między cytokinami a komórkami nowotworowymi. Ta wrażliwość na cytokiny, takie jak czynnik martwicy nowotworów (TNF) i TRAIL (ligand indukujący apoptozę związany z TNF), pozycjonuje linię komórkową WEHI-164 jako przydatne źródło do badania szlaków sygnałowych, które pośredniczą w śmierci komórki i do badania potencjalnych terapii przeciwnowotworowych, które mogłyby manipulować tymi szlakami. Dodatkowo, właściwości linii komórkowej podobne do fibroblastów pozwalają na badania morfologii komórek, charakterystyki wzrostu i mikrośrodowiska guza, zapewniając bardziej kompleksowe zrozumienie dynamiki guza i interakcji w obrębie macierzy komórkowej.

Pomimo szerokiego zastosowania w badaniach, linia komórkowa WEHI-164 wykazuje kilka aberracji chromosomalnych, co jest powszechne wśród komórek przekształconych w wyniku chemicznej kancerogenezy. Te niestabilności genetyczne mają kluczowe znaczenie dla badań koncentrujących się na zrozumieniu, w jaki sposób zmiany genetyczne mogą wpływać na progresję raka i odpowiedź na leczenie. Ciągłe wykorzystywanie WEHI-164 w różnych konfiguracjach badawczych podkreśla jego przydatność w pogłębianiu wiedzy na temat biologii raka i opracowywaniu nowych podejść terapeutycznych.

Choroba
Włókniakomięsak
Synonimy
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Fibroblast
Nowotworotwórczy
Tak, u myszy Balb/c

04Identyfikatory

Źródło
WEHI-164 (numer katalogowy Cytion 400438)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 48 godzin, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c