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WERI-Rb-1
Tessuto
Occhio
Malattia
Retinoblastoma
Sinonimi
WERI-RB-1, WERI-Rb 1, WERI-Rb1, WERI-RB1, WERI Rb-1, WERIRb1, WERI, Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1

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WERI-Rb-1

Cell line · Codice prodotto 300632

The WERI-Rb-1 cell line is derived from a retinoblastoma, a rare malignant tumor of the retina that typically manifests in early childhood. This cell line...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare WERI-Rb-1 deriva da un retinoblastoma, un raro tumore maligno della retina che si manifesta tipicamente nella prima infanzia. Questa linea cellulare è stata creata per fornire un modello coerente e replicabile per lo studio della biologia del retinoblastoma, offrendo approfondimenti sui meccanismi genetici, molecolari e cellulari alla base di questa forma di cancro. Le cellule WERI-Rb-1 sono particolarmente apprezzate nella ricerca oncologica per la loro utilità nello studio dei processi fisiopatologici e dei potenziali bersagli terapeutici del retinoblastoma.

Le cellule WERI-Rb-1 presentano caratteristiche tipiche del retinoblastoma, tra cui l'espressione di marcatori neuronali e la capacità di formare aggregati cellulari simili alle rosette di Flexner-Wintersteiner, un segno distintivo dell'istologia del retinoblastoma. Queste cellule sono state ampiamente utilizzate per studiare il ruolo degli oncogeni e dei geni soppressori del tumore nello sviluppo del cancro, con particolare attenzione al gene RB1, le cui mutazioni sono fondamentali nell'eziologia del retinoblastoma. Inoltre, WERI-Rb-1 è uno strumento importante per la valutazione di agenti chemioterapici e di nuovi sistemi di somministrazione di farmaci volti a migliorare i risultati del trattamento dei pazienti affetti da retinoblastoma.

Tessuto
Occhio
Malattia
Retinoblastoma
Applicazioni
coltura cellulare 3D
Sinonimi
  • WERI-RB-1
  • WERI-Rb 1
  • WERI-Rb1
  • WERI-RB1
  • WERI Rb-1
  • WERIRb1
  • WERI
  • Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tumorigenico
Sì, nei conigli
Cariotipo
Cariotipo umano pseudodiploide con il 3,9% di poliploidia.9% di poliploidia - 46(41-48)<2n>xx, +6, -10, -10, -14, -22, +3mar, add(3)(q25), add(3)(q25), add(4)(p15), add(5)(q35), i(6q), del(7)(p21), add(9)(q33), der(13)x2, add(16)(q23), add(16)(q23), i(17q), add(19)(q13) - apparentemente (uniparentale?) riarrangiamento disomico del ch 13 - corrisponde al cariotipo riportato

04Identificatori

Riferimento bibliografico
WERI-Rb-1 (numero di catalogo Cytion 300632)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1792

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 1, PGM1, 1, PGM3, 0
Virus
EBV -, HBV -, HCV -, HHV-8 -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -
Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e 0,01 mg/mL di insulina
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
1 anno