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HEK293-CLDN18.2
Pañuelo de papel
Riñón fetal
Enfermedad
Transformadas/inmortalizadas; no tumorigénicas (linaje HEK293)

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HEK293-CLDN18.2

Cell line · Número de producto 305986

Aviso legal: Los precios que se muestran para las líneas celulares son exclusivamente para clientes del ámbito académico o sin ánimo de lucro. Para las entidades comerciales, el pre...

€1,900.00sin impuestos ni gastos de envío
Hecho por encargo
1

01Información general

Descripción

Aviso legal: Los precios que se muestran para las líneas celulares son exclusivamente para clientes del ámbito académico o sin ánimo de lucro. Para las entidades comerciales, el precio es de aproximadamente 6.250 €.
Si representa a una entidad comercial o no está seguro de a qué categoría pertenece, póngase en contacto con nosotros.


Las células HEK293-CLDN18.2 son células renales embrionarias humanas 293 (HEK293) modificadas genéticamente para expresar de forma estable la isoforma 2 de la claudina 18 humana (CLDN18.2), una proteína transmembrana asociada a las uniones estrechas que pertenece a la familia de las claudinas. La CLDN18.2 es una isoforma específica del linaje gástrico que normalmente se limita a las células epiteliales diferenciadas de la mucosa gástrica, donde sus dominios extracelulares son en gran medida inaccesibles en condiciones fisiológicas. En la transformación maligna, la alteración de la polaridad epitelial y la arquitectura de las uniones estrechas expone la CLDN18.2 en la superficie de las células tumorales, lo que conduce a su sobreexpresión y accesibilidad en varios tipos de cáncer, entre ellos el adenocarcinoma gástrico, el cáncer de la unión gastroesofágica, el cáncer de páncreas y otras neoplasias malignas gastrointestinales. Debido a su distribución tisular normal altamente restringida y a su exposición asociada a tumores, CLDN18.2 se ha convertido en una diana terapéutica clínicamente importante en oncología.

Las células HEK293-CLDN18.2 se utilizan ampliamente para el desarrollo y la caracterización de terapias dirigidas a CLDN18.2, incluyendo anticuerpos monoclonales, conjugados de anticuerpos y fármacos, anticuerpos biespecíficos, terapias con células CAR-T y CAR-NK, y agentes de imagen dirigidos. El sistema de expresión recombinante estable permite el análisis cuantitativo de la afinidad de unión al antígeno, la especificidad del epítopo, la densidad del receptor, la cinética de internalización y la citotoxicidad dependiente del objetivo. Estas células también se emplean habitualmente en ensayos de citometría de flujo, ensayos con marcadores, flujos de trabajo de cribado de anticuerpos y estudios de la función de los efectores inmunitarios diseñados para evaluar la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) o la citotoxicidad dependiente del complemento (CDC). Dado que las células HEK293 permiten una expresión recombinante robusta de proteínas de membrana y una propagación eficiente, constituyen una plataforma fiable para el desarrollo de ensayos estandarizados con CLDN18.2 y la validación terapéutica.

Pañuelo de papel
Riñón fetal
Enfermedad
Transformadas/inmortalizadas; no tumorigénicas (linaje HEK293)
Aplicaciones
Desarrollo de anticuerpos dirigidos contra CLDN18.2 y de ADC; terapia celular CAR-T/CAR-NK; ensayos de ADCC/CDC; citometría de flujo; tratamientos contra el cáncer gástrico, de la unión gastroesofágica y de páncreas

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CLDN18.2 expression construct for tight junction antigen studies and targeted cancer therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales
Tiempo de duplicación
aprox. 24-36 horas

04Identificadores

Referencia
HEK293-CLDN18.2 (número de catálogo de Cytion 305986)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_E5J2

05Expresión y susceptibilidad

Antígenos de superficie
CLDN18.2
Receptores expresados
CDLN18.2

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Añade al medio un 10 % de FBS, 1 mM de piruvato de sodio, 10 mM de HEPES y un 1 % de NEAA. Añade blasticidina (clorhidrato de blasticidina) hasta alcanzar una concentración final de 5 µg/mL.
Reactivo de disociación
Tripsina-EDTA
Subcultivo
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspirar el medio de cultivo antiguo de las células adherentes y lavarlas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, añadir el volumen apropiado de solución de tripsina/EDTA en función del tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un matraz T25, 3 ml para un matraz T75) e incubar a temperatura ambiente o 37°C hasta que las células se desprendan (5-10 minutos). Controlar el desprendimiento con un microscopio y, si es necesario, golpear suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, añadir medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspender suavemente las células y transferir una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Colocar el recipiente en una incubadora a 37°C con un 5% deCO2 y cambiar el medio cada 2-3 días.
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
De 2 a 4 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación

Tras la descongelación, dividir las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en matraces T25 y dejar que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (para cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Feto