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HEK293-CLDN18.2
Tecido
Rim fetal
Doença
Transformado/imortalizado; não tumorigénico (linha celular HEK293)

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HEK293-CLDN18.2

Cell line · Número do produto 305986

Aviso legal: Os preços apresentados para as linhas celulares destinam-se exclusivamente a clientes do setor académico ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço...

€1,900.00sem impostos nem portes de envio
Feito por encomenda
1

01Informações gerais

Descrição

Aviso legal: Os preços apresentados para as linhas celulares destinam-se exclusivamente a clientes do setor académico ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente 6 250 €.
Se representar uma entidade comercial ou não tiver a certeza de qual a categoria a que se enquadra, por favor contacte-nos.


As células HEK293-CLDN18.2 são células renais embrionárias humanas 293 (HEK293) modificadas para expressarem de forma estável a isoforma 2 da claudina 18 humana (CLDN18.2), uma proteína transmembranar associada às junções apertadas pertencente à família das claudinas. A CLDN18.2 é uma isoforma específica da linhagem gástrica, normalmente restrita às células epiteliais da mucosa gástrica diferenciadas, onde os seus domínios extracelulares são em grande parte inacessíveis em condições fisiológicas. Na transformação maligna, a perturbação da polaridade epitelial e da arquitetura das junções apertadas expõe a CLDN18.2 na superfície das células tumorais, levando à sua sobreexpressão e acessibilidade em vários tipos de cancro, incluindo o adenocarcinoma gástrico, o cancro da junção gastroesofágica, o cancro pancreático e outras neoplasias malignas gastrointestinais. Devido à sua distribuição tecidual normal altamente restrita e à sua exposição associada a tumores, o CLDN18.2 surgiu como um alvo terapêutico clinicamente importante na oncologia.

As células HEK293-CLDN18.2 são amplamente utilizadas para o desenvolvimento e caracterização de terapêuticas direcionadas para a CLDN18.2, incluindo anticorpos monoclonais, conjugados anticorpo-fármaco, anticorpos bispecíficos, terapias com células CAR-T e CAR-NK e agentes de imagiologia direcionados. O sistema de expressão recombinante estável permite a análise quantitativa da afinidade de ligação do antígeno, da especificidade do epítopo, da densidade do recetor, da cinética de internalização e da citotoxicidade dependente do alvo. Estas células são também frequentemente utilizadas em ensaios de citometria de fluxo, ensaios de repórter, fluxos de trabalho de triagem de anticorpos e estudos funcionais de efetores imunitários concebidos para avaliar a citotoxicidade celular dependente de anticorpos (ADCC) ou a citotoxicidade dependente do complemento (CDC). Uma vez que as células HEK293 suportam uma expressão robusta de proteínas de membrana recombinantes e uma propagação eficiente, proporcionam uma plataforma fiável para o desenvolvimento de ensaios CLDN18.2 padronizados e a validação terapêutica.

Tecido
Rim fetal
Doença
Transformado/imortalizado; não tumorigénico (linha celular HEK293)
Aplicações
Desenvolvimento de anticorpos e ADC direcionados para o CLDN18.2; terapia com células CAR-T/CAR-NK; ensaios de ADCC/CDC; citometria de fluxo; terapêuticas para o cancro gástrico, da junção gastroesofágica e do pâncreas

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CLDN18.2 expression construct for tight junction antigen studies and targeted cancer therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais
Tempo de duplicação
aprox. 24-36 horas

04Identificadores

Referência
HEK293-CLDN18.2 (número de catálogo da Cytion 305986)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_E5J2

05Expressão e suscetibilidade

Antigénios de superfície
CLDN18.2
Receptores expressos
CDLN18.2

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Adicione ao meio 10 % de FBS, 1 mM de piruvato de sódio, 10 mM de HEPES e 1 % de NEAA. Adicione blasticidina (cloridrato de blasticidina) até atingir uma concentração final de 5 µg/mL.
Reagente de dissociação
Tripsina-EDTA
Subcultura
Para cultura de rotina de células aderentes: Aspirar o meio de cultura antigo das células aderentes e lavá-las com PBS para remover qualquer meio restante. Depois de aspirar o PBS, adicionar o volume adequado de solução de tripsina/EDTA com base no tamanho do recipiente de cultura (por exemplo, 1 ml para um frasco T25, 3 ml para um frasco T75) e incubar à temperatura ambiente ou a 37°C até as células se destacarem (5-10 minutos). Monitorizar o desprendimento sob um microscópio e, se necessário, bater suavemente no recipiente para libertar as células. Uma vez desprendidas, adicionar meio completo para inativar a tripsina/EDTA, ressuspender suavemente as células e transferir uma alíquota da suspensão de células para um novo recipiente de cultura contendo meio fresco. Colocar o recipiente numa incubadora regulada para 37°C com 5%de CO2 e mudar o meio a cada 2-3 dias.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
2 a 4 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento

Após a descongelação, dividir as células numa proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e deixar as células recuperar do processo de congelação e aderir (para culturas aderentes) durante pelo menos 24 horas.

Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Feto