HEK293-CLDN18.2

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Le cellule HEK293-CLDN18.2 sono cellule renali embrionali umane 293 (HEK293) ingegnerizzate per esprimere in modo stabile la claudina 18 isoforma 2 (CLDN18.2) umana, una proteina transmembrana associata alle giunzioni strette appartenente alla famiglia delle claudine. CLDN18.2 è un'isoforma specifica del lignaggio gastrico normalmente limitata alle cellule epiteliali della mucosa gastrica differenziate, dove i suoi domini extracellulari sono in gran parte inaccessibili in condizioni fisiologiche. Nella trasformazione maligna, la rottura della polarità epiteliale e dell'architettura delle giunzioni strette espone CLDN18.2 sulla superficie delle cellule tumorali, portando alla sua sovraespressione e accessibilità in diversi tumori, tra cui l'adenocarcinoma gastrico, il cancro della giunzione gastroesofagea, il cancro al pancreas e altre neoplasie gastrointestinali. A causa della sua distribuzione tissutale normale altamente limitata e dell'esposizione associata al tumore, CLDN18.2 è emerso come un bersaglio terapeutico clinicamente importante in oncologia.

Le cellule HEK293-CLDN18.2 sono ampiamente utilizzate per lo sviluppo e la caratterizzazione di terapie mirate a CLDN18.2, tra cui anticorpi monoclonali, coniugati anticorpo-farmaco, anticorpi bispecifici, terapie con cellule CAR-T e CAR-NK e agenti di imaging mirato. Il sistema di espressione ricombinante stabile consente l'analisi quantitativa dell'affinità di legame dell'antigene, della specificità dell'epitopo, della densità del recettore, della cinetica di internalizzazione e della citotossicità dipendente dal bersaglio. Queste cellule sono comunemente impiegate anche in saggi di citometria a flusso, saggi reporter, flussi di lavoro di screening degli anticorpi e studi funzionali sugli effettori immunitari progettati per valutare la citotossicità cellulare anticorpo-dipendente (ADCC) o la citotossicità complemento-dipendente (CDC). Poiché le cellule HEK293 supportano una robusta espressione di proteine di membrana ricombinanti e una propagazione efficiente, forniscono una piattaforma affidabile per lo sviluppo standardizzato di saggi CLDN18.2 e la validazione terapeutica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

Dopo lo scongelamento, dividere le cellule in un rapporto da 1:2 a 1:3 in fiasche T25 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano (per le colture aderenti) per almeno 24 ore.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia