Gå direkte til indholdet
HEK293-CLDN18.2
Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)

Dokumenter

HEK293-CLDN18.2

Cell line · Varenummer 305986

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder gælder pr...

€1,900.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser for cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder i non-profit-sektoren. For kommercielle virksomheder er prisen ca. 6.250 €.
Hvis du repræsenterer en kommerciel virksomhed eller er i tvivl om, hvilken kategori der gælder, bedes du kontakte os.


HEK293-CLDN18.2-celler er humane embryonale nyreceller 293 (HEK293), der er genetisk modificeret til stabilt at udtrykke human claudin 18 isoform 2 (CLDN18.2), et tætforbindelsesassocieret transmembranprotein, der tilhører claudin-familien. CLDN18.2 er en mave-linjespecifik isoform, der normalt er begrænset til differentierede epitelceller i maveslimhinden, hvor dets ekstracellulære domæner stort set er utilgængelige under fysiologiske forhold. Ved malign transformation eksponerer forstyrrelse af epitelpolaritet og tæt forbindelsesarkitektur CLDN18.2 på tumorcelleoverfladen, hvilket fører til dets overekspression og tilgængelighed i flere kræftformer, herunder gastrisk adenokarcinom, kræft i gastroøsofageal overgang, bugspytkirtelkræft og andre gastrointestinale maligniteter. På grund af sin meget begrænsede normale vævsfordeling og tumorassocierede eksponering er CLDN18.2 fremstået som et klinisk vigtigt terapeutisk mål inden for onkologi.

HEK293-CLDN18.2-celler anvendes i vid udstrækning til udvikling og karakterisering af CLDN18.2-målrettede lægemidler, herunder monoklonale antistoffer, antistof-lægemiddelkonjugater, bispecifikke antistoffer, CAR-T- og CAR-NK-celleterapier samt målrettede billeddannelsesmidler. Det stabile rekombinante ekspressionssystem muliggør kvantitativ analyse af antigenbindingsaffinitet, epitopspecificitet, receptortæthed, internaliseringskinetik og målafhængig cytotoksicitet. Disse celler anvendes også ofte i flowcytometri-assays, reporterassays, antistofscreeningsworkflows og funktionelle undersøgelser af immuneffektorer, der er designet til at evaluere antistofafhængig cellulær cytotoksicitet (ADCC) eller komplementafhængig cytotoksicitet (CDC). Da HEK293-celler understøtter robust rekombinant membranproteinekspression og effektiv forplantning, udgør de en pålidelig platform til standardiseret udvikling af CLDN18.2-assays og terapeutisk validering.

Væv
Fosterets nyre
Sygdom
Transformeret/udeværet; ikke-tumorigen (HEK293-baggrund)
Anvendelser
Udvikling af antistoffer og ADC’er rettet mod CLDN18.2; CAR-T-/CAR-NK-celleterapi; ADCC-/CDC-analyser; flowcytometri; behandlingsmetoder mod mavekræft, kræft i mave-tarm-overgangen og bugspytkirtelkræft

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CLDN18.2 expression construct for tight junction antigen studies and targeted cancer therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
Fordoblingstid
ca. 24–36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293-CLDN18.2 (Cytion-katalognummer 305986)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_E5J2

05Udtryk og modtagelighed

Overfladeantigener
CLDN18.2
Udtrykte receptorer
CDLN18.2

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt 10 % FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES og 1 % NEAA til mediet. Tilsæt blasticidin (blasticidinhydrochlorid), så den endelige koncentration bliver 5 µg/mL.
Dissociationsreagens
Trypsin-EDTA
Oddyrkning
Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning

Efter optøning deles cellerne i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellerne får lov til at komme sig over fryseprocessen og klæbe (for klæbende kulturer) i mindst 24 timer.

Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Foster