Preskoči na vsebino
HEK293-CLDN18.2
Tkivo
Plodove ledvice
Bolezen
Preoblikovano/imortalizirano; netumorogeno (na podlagi celic HEK293)

Dokumenti

HEK293-CLDN18.2

Cell line · Številka izdelka 305986

Opozorilo: Cene, prikazane za celične linije, veljajo izključno za akademske/neprofitne stranke. Za komercialne subjekte veljajo cene...

€1,900.00brez davka in stroškov poštnine
Po naročilu
1

01Splošne informacije

Opis

Opomba: Cene, prikazane za celične linije, veljajo izključno za akademsko in neprofitno javnost. Za komercialne subjekte znaša cena približno 6.250 €.
Če zastopate komercialni subjekt ali niste prepričani, v katero kategorijo spadate, vas prosimo, da nas kontaktirate.


Celice HEK293-CLDN18.2 so človeške embrionalne ledvične celice 293 (HEK293), ki so bile genetsko spremenjene za stabilno izražanje človeškega klavdina 18 izoforme 2 (CLDN18.2), transmembranskega proteina, povezanega s tesnimi spojmi, ki pripada družini klavdinov. CLDN18.2 je izoforma, specifična za želodčno linijo, ki je običajno omejena na diferencirane epitelne celice želodčne sluznice, kjer so njene ekstracelularne domene v fizioloških pogojih v glavnem nedostopne. Pri maligni transformaciji motnja epitelne polaritete in arhitekture tesnih spojev izpostavi CLDN18.2 na površini tumorske celice, kar vodi do njegove prekomerne ekspresije in dostopnosti pri več vrstah raka, vključno z adenokarcinomom želodca, rakom gastroezofagealnega prehoda, rakom trebušne slinavke in drugimi malignimi obolenji prebavil. Zaradi svoje zelo omejene normalne porazdelitve v tkivu in izpostavljenosti, povezane s tumorjem, se je CLDN18.2 uveljavil kot klinično pomemben terapevtski cilj v onkologiji.

Celice HEK293-CLDN18.2 se široko uporabljajo za razvoj in karakterizacijo terapij, usmerjenih v CLDN18.2, vključno z monoklonskimi protitelesi, konjugati protiteles-zdravil, bispecifičnimi protitelesi, terapijami s celicami CAR-T in CAR-NK ter ciljnimi sredstvi za slikanje. Stabilen rekombinantni ekspresijski sistem omogoča kvantitativno analizo afinitete vezave antigena, specifičnosti epitopa, gostote receptorjev, kinetike internalizacije in ciljno odvisne citotoksičnosti. Te celice se pogosto uporabljajo tudi v testih s pretočno citometrijo, testih z reporterji, delovnih postopkih za presejanje protiteles in študijah funkcionalnosti imunskih efektorjev, namenjenih ocenjevanju protitelesno odvisne celične citotoksičnosti (ADCC) ali komplementno odvisne citotoksičnosti (CDC). Ker celice HEK293 podpirajo robustno rekombinantno ekspresijo membranskih proteinov in učinkovito razmnoževanje, zagotavljajo zanesljivo platformo za standardiziran razvoj testov CLDN18.2 in terapevtsko validacijo.

Tkivo
Plodove ledvice
Bolezen
Preoblikovano/imortalizirano; netumorogeno (na podlagi celic HEK293)
Uporaba
Razvoj protiteles, usmerjenih proti CLDN18.2, in ADC; terapija s celicami CAR-T/CAR-NK; testi ADCC/CDC; pretočna citometrija; zdravila za raka želodca, prehoda med želodcem in požiralnikom ter raka trebušne slinavke

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CLDN18.2 expression construct for tight junction antigen studies and targeted cancer therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijske celice
Čas podvojitve
približno 24–36 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HEK293-CLDN18.2 (kataloška številka Cytion 305986)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_E5J2

05Izražanje in dovzetnost

Površinski antigeni
CLDN18.2
Izraženi receptorji
CDLN18.2

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gozdu dodajte 10 % FBS, 1 mM natrijevega piruvata, 10 mM HEPES in 1 % NEAA. Dodajte blasticidin (blasticidin hidroklorid), da dosežete končno koncentracijo 5 µg/mL.
Reagenca za disociacijo
Tripsin-EDTA
Preusmeritev v drugo kulturo
Za rutinsko gojenje adherentnih celic: Iz adherentnih celic odsesajte staro gojišče in jih sperite s PBS, da odstranite preostalo gojišče. Po odsesanju PBS dodajte ustrezno količino raztopine tripsina/EDTA glede na velikost posode za gojenje (npr. 1 ml za bučko T25, 3 ml za bučko T75) in inkubirajte pri sobni temperaturi ali 37 °C, dokler se celice ne ločijo (5-10 minut). Odlepitev spremljajte pod mikroskopom in po potrebi nežno potrkajte posodo, da se celice sprostijo. Ko se celice odcepijo, dodajte popolno gojišče za inaktivacijo tripsina/EDTA, nežno ponovno suspendirajte celice in prenesite alikvot celične suspenzije v novo posodo za gojenje s svežim gojiščem. Posodo postavite v inkubator, nastavljen na 37 °C s 5 %CO2, in gojišče zamenjajte vsake 2 do 3 dni.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
2 do 4 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju

Po odmrznitvi celice razdelite v razmerju 1:2 do 1:3 v bučke T25 in pustite, da si celice opomorejo od postopka zamrzovanja in da se zlepijo (za lepljive kulture) vsaj 24 ur.

Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Plod