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- Pañuelo de papel
- Cérvix
- Enfermedad
- Carcinoma
- Sinónimos
- HeLa Kyoto EB3-EGFP, HeLa Kyoto EB3 EGFP, HeLa Kyoto EGFP-EB3
Documentos
HK EB3-EGFP
Cell line · Número de producto 300668
Hela Kyoto EB3-EGFP is a derivative of the HeLa Kyoto cell line, specifically engineered to express the End-Binding Protein 3 (EB3) tagged with Enhanced G...
Personalización / Recomendaciones
- HK EB3-EGFPCell line€800.00
Recomendado (lote más fresco)
01Información general
- Descripción
Hela Kyoto EB3-EGFP es un derivado de la línea celular HeLa Kyoto, específicamente diseñada para expresar la proteína de unión terminal 3 (EB3) marcada con la proteína fluorescente verde mejorada (EGFP). Esta línea celular se utiliza habitualmente en la investigación centrada en la comprensión de la dinámica de los microtúbulos debido al marcado fluorescente de EB3, una proteína que se asocia con los extremos positivos de los microtúbulos. La expresión de EGFP proporciona un marcador fluorescente que permite la visualización en tiempo real del comportamiento de los microtúbulos en células vivas bajo un microscopio de fluorescencia.
Esta línea celular es especialmente valiosa en la biología celular y la investigación del cáncer, donde es crucial comprender la mecánica de la división celular y el transporte intracelular. La expresión estable de EB3-EGFP no interfiere con las funciones normales de los microtúbulos, lo que convierte a estas células en una herramienta fiable para estudios detallados de los procesos celulares que dependen de la dinámica de los microtúbulos.
- Pañuelo de papel
- Cérvix
- Enfermedad
- Carcinoma
- Sinónimos
- HeLa Kyoto EB3-EGFP
- HeLa Kyoto EB3 EGFP
- HeLa Kyoto EGFP-EB3
02Clasificación
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Mujer
- Propiedades de crecimiento
- Adherente
- Situación respecto a los OMG
- GMO-S1
- Detalles sobre la presencia de OMG
- GMO-S1: This HeLa Kyoto EB3-EGFP line contains an EGFP-tagged EB3 construct for dynamic microtubule visualization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nivel de bioseguridad
- 1
03Características
- Morfología
- Células de aspecto epitelial con forma de piedra en mosaico
04Identificadores
- Referencia
- HK EB3-EGFP (número de catálogo de Cytion 300668)
- N.º de identificación fiscal del NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1D61
- Depositario
- Laboratorio Ellenberg (EMBL)
05Expresión y susceptibilidad
- Expresión de proteínas
- MEGFP (microtubule End-binding protein 3 mEGFP tagged): Localización/Gen: 1..589 / Pcmv, 652..1497 / EB3, 1516..2235 / EGFP, 3466..4260 / KanR/NeoR
- Productos
- CMV Promotor EB3, Neomicina, Fosfotransferasa
06Manejo y cultivo
- Medio de cultivo
- DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
- Atmósfera de incubación
37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.
- Suplementos
- Complementar el medio con un 10% de FBS
- Reactivo de disociación
- Accutase
- Subcultivo
- Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
- Densidad de siembra
- 1 x 104 células/cm2
- Renovación de fluidos
- de 2 a 3 veces por semana
- Recuperación tras la descongelación
- Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Descongelación y cultivo
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Control de calidad y criopreservación
- Esterilidad
La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.
Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Medio de congelación
- Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
- Condiciones de almacenamiento
Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.
- Condiciones de envío
Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.
08Donante
- Edad del donante
- 30 años
- Origen étnico
- Afroamericanos
09Aspectos legales y de seguridad
- Medidas de seguridad
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su futura descongelación, es obligatorio cumplir estrictas medidas de seguridad. Es esencial utilizar guantes y ropa de protección adecuados, así como una mascarilla o gafas de seguridad durante el traslado de muestras congeladas desde o hacia el tanque de nitrógeno líquido. Con ello se pretende mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones crioviales al extraerlas, que pueden dar lugar a la proyección de fragmentos afilados.
- Garantía
En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto
Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía
- Se aplican los acuerdos con terceros
- Sí
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