HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

La línea celular HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry es un modelo celular derivado de Hela Kyoto genéticamente modificado y desarrollado para facilitar estudios avanzados sobre la dinámica nuclear y la organización de la cromatina en células vivas. Esta línea celular expresa dos proteínas de fusión: EGFP (proteína fluorescente verde mejorada) fusionada con la Lámina A, y mCherry (una proteína fluorescente roja) fusionada con la Histona H2B. La fusión EGFP-Lamina A resalta la envoltura nuclear y permite visualizar los cambios en la arquitectura nuclear durante la progresión del ciclo celular o en diversas condiciones experimentales. Por su parte, la proteína de fusión H2B-mCherry se une al ADN y proporciona una intensa fluorescencia roja que marca la cromatina, permitiendo la observación en tiempo real de los procesos cromosómicos durante la mitosis y la interfase.

Estas células tienen un valor incalculable para aplicaciones de imagen en tiempo real, incluidos estudios sobre la integridad nuclear, la replicación del ADN y el envejecimiento celular, así como para la investigación de enfermedades en las que la arquitectura nuclear está alterada, como el cáncer y las laminopatías. La fluorescencia bicolor de esta línea celular permite la visualización simultánea de la envoltura nuclear y de la cromatina, lo que facilita una comprensión exhaustiva de las interacciones núcleo-citoplasma y de la organización espaciotemporal de la cromatina. Estas capacidades la convierten en una herramienta fundamental para la investigación en biología molecular y biofísica celular, que permite comprender la mecánica de la regulación de la expresión génica, la organización nuclear y el ciclo celular.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía