HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

Celična linija HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry je gensko spremenjen model celic, ki izhaja iz Hela Kyoto, razvit za lažje napredne študije jedrske dinamike in organizacije kromatina v živih celicah. Ta celična linija izraža dva fuzijska proteina: EGFP (okrepljen zeleni fluorescenčni protein), združen z laminom A, in mCherry (rdeči fluorescenčni protein), združen s histonom H2B. Fuzija EGFP-Lamin A poudarja jedrno ovojnico in omogoča vizualizacijo sprememb jedrne arhitekture med napredovanjem celičnega cikla ali pod različnimi eksperimentalnimi pogoji. Medtem se fuzijski protein H2B-mCherry veže na DNK in zagotavlja živo rdečo fluorescenco, ki označuje kromatin, kar omogoča opazovanje kromosomskih procesov v realnem času med mitozo in interfazo.

Te celice so neprecenljive za aplikacije slikanja v realnem času, vključno s študijami jedrske celovitosti, replikacije DNK in celičnega staranja ter raziskavami bolezni, pri katerih je jedrska arhitektura motena, kot so rak in laminopatije. Dvobarvna fluorescenca te celične linije omogoča hkratno vizualizacijo jedrske ovojnice in kromatina, kar omogoča celovito razumevanje interakcij med jedrom in citoplazmo ter prostorsko-časovne organizacije kromatina. Zaradi takšnih zmogljivosti je ključno orodje za raziskave v molekularni biologiji in celični biofiziki, saj omogoča vpogled v mehaniko regulacije izražanja genov, jedrno organizacijo in celični cikel.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo