HK EGFP-alfa-tubulin/H2B-mCherry

Celična linija HK EGFP-alfa-tubulin/H2B-mCherry HeLa Kyoto je skrbno izdelan model, namenjen podrobni vizualizaciji celičnih procesov. Ta klonska linija je bila stabilno transficirana za izražanje dveh fluorescenčnih proteinov, ki omogočata slikanje kromatina in mikrotubularnega omrežja v realnem času. Rdeči fluorescenčni protein mCherry je spojen z osrednjim histonskim proteinom H2B, tako da nastane H2B-mCherry. Ta fuzijski protein se izraža iz plazmida pH2B-mCherry-IRES-neo3 in služi kot označevalec kromatina, ki pri slikanju živih celic poudari jedrno DNK ter olajša študije dinamike kromatina in jedrne arhitekture.

Poleg tega ta celična linija izraža monomerni okrepljeni GFP (zeleni fluorescenčni protein), spojen z α-tubulinom, ki je vnesen s plazmidom pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b. Fuzija GFP-α-tubulina zagotavlja živo zeleno fluorescenco, ki opisuje strukture mikrotubulov v celici. Ta lastnost je ključna za preučevanje organizacije mikrotubulov, njihove dinamike in vloge pri celični delitvi in znotrajceličnem transportu. Stabilna integracija teh konstruktov omogoča neprekinjeno, dolgoročno opazovanje teh celičnih komponent brez potrebe po večkratni transfekciji, s čimer se zmanjša variabilnost in poveča zanesljivost eksperimentalnih rezultatov. Izbira odpornosti na zdravila po transfekciji zagotavlja stabilnost in enotnost izražanja med celicami v tej liniji.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo