HK EGFP-alfa-tubulin/H2B-mCherry

HK EGFP-alfa-tubulin/H2B-mCherry HeLa Kyoto hücre hattı, hücresel süreçlerin ayrıntılı görselleştirilmesi için titizlikle tasarlanmış bir modeldir. Bu klonal çizgi, hem kromatin hem de mikrotübüler ağın gerçek zamanlı görüntülenmesini sağlayan iki floresan protein füzyonunu ifade etmek için kararlı bir şekilde transfekte edilmiştir. Kırmızı floresan protein mCherry, çekirdek histon proteini H2B'ye kaynaştırılarak H2B-mCherry oluşturulur. Bu füzyon proteini pH2B-mCherry-IRES-neo3 plazmidinden ifade edilir ve canlı hücre görüntülemede nükleer DNA'yı vurgulayarak ve kromatin dinamikleri ve nükleer mimari üzerine çalışmaları kolaylaştırarak bir kromatin işaretleyici görevi görür.

Ek olarak, bu hücre hattı pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b plazmidi aracılığıyla tanıtılan α-tubuline kaynaşmış monomerik geliştirilmiş GFP'yi (Yeşil Floresan Protein) ifade eder. GFP-α-tubulin füzyonu, hücre içindeki mikrotübül yapılarını özetleyen canlı bir yeşil floresan sağlar. Bu özellik, mikrotübül organizasyonu, dinamikleri ve bunların hücre bölünmesi ve hücre içi taşınmasındaki rollerini incelemek için çok önemlidir. Bu yapıların istikrarlı entegrasyonu, tekrarlanan transfeksiyona gerek kalmadan bu hücresel bileşenlerin sürekli ve uzun süreli gözlemlenmesine olanak tanıyarak değişkenliği azaltır ve deneysel sonuçların güvenilirliğini artırır. Transfeksiyonu takiben ilaç direnci seçimi, bu hattaki hücreler arasında ifadenin istikrarını ve homojenliğini sağlar.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın