HK EGFP-alpha-tubulin/H2B-mCherry

קו התאים HK EGFP-alpha-tubulin/H2B-mCherry HeLa Kyoto הוא מודל שתוכנן בקפידה לצורך הדמיה מפורטת של תהליכים תאיים. קו תאים משובט זה עבר טרנספקציה יציבה כדי לבטא שני חלבונים פלואורסצנטיים משולבים המאפשרים הדמיה בזמן אמת של כרומטין ושל רשת המיקרו-צינורות. החלבון הזוהר האדום mCherry מתמזג עם חלבון ההיסטון H2B, ויוצר H2B-mCherry. חלבון מיזוג זה מבוטא מהפלסמיד pH2B-mCherry-IRES-neo3 ומשמש כסמן כרומטין, המדגיש את ה-DNA הגרעיני בהדמיה של תאים חיים ומקל על מחקרים על דינמיקת הכרומטין וארכיטקטורת הגרעין.

בנוסף, קו תאים זה מבטא GFP (חלבון פלואורסצנטי ירוק) משופר מונומרי הממוזג עם α-tubulin, המוכנס באמצעות הפלסמיד pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b. המיזוג של GFP-α-tubulin מספק פלואורסצנטיות ירוקה עזה המתארת את מבני המיקרו-צינורות בתוך התא. תכונה זו חיונית לחקר ארגון המיקרוטובולים, הדינמיקה שלהם ותפקידם בחלוקת התאים ובהובלה התוך-תאית. השילוב היציב של מבנים אלה מאפשר תצפית רציפה וארוכת טווח על רכיבים תאיים אלה ללא צורך בהעברה חוזרת, ובכך מפחית את השונות ומשפר את אמינות תוצאות הניסוי. בחירת עמידות לתרופות לאחר ההעברה מבטיחה את היציבות והאחידות של הביטוי בין התאים בקו זה.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו