HK EGFP-alpha-tubulin/H2B-mCherry

HK EGFP-α-微管蛋白/H2B-mCherry HeLa Kyoto 細胞系是一種經過精心設計的模型，旨在詳細呈現細胞過程。此克隆細胞系已透過穩定轉染，可表達兩種螢光蛋白融合蛋白，從而實現對染色質及微管網絡的即時成像。 紅色螢光蛋白 mCherry 與核心組蛋白 H2B 融合，形成 H2B-mCherry。 此融合蛋白由 pH2B-mCherry-IRES-neo3 質體表達，用作染色質標記物，在活細胞成像中突顯核 DNA，並有助於研究染色質動力學與核結構。

此外，此細胞系透過 pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b 質體，表達與 α-微管蛋白融合的單體增強型 GFP（綠色螢光蛋白）。 GFP-α-微管蛋白融合蛋白會發出鮮豔的綠色螢光，勾勒出細胞內的微管結構輪廓。此特性對於研究微管的組織、動態及其在細胞分裂與細胞內運輸中的作用至關重要。 這些構建體的穩定整合，使得無需反覆轉染即可持續、長期地觀察這些細胞成分，從而降低變異性並提高實驗結果的可靠性。轉染後的抗藥性篩選，確保了該細胞系中各細胞的表達穩定性與均一性。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。