HK EGFP-alfa-tubuliini/H2B-mCherry

HK EGFP-alfa-tubuliini/H2B-mCherry HeLa Kyoto -solulinja on huolellisesti suunniteltu malli, joka on suunniteltu soluprosessien yksityiskohtaiseen visualisointiin. Tämä kloonilinja on transfektoitu vakaasti ilmentämään kahta fluoresoivaa proteiinifuusiota, jotka mahdollistavat sekä kromatiinin että mikrotubulaarisen verkoston reaaliaikaisen kuvantamisen. Punainen fluoresoiva proteiini mCherry on fuusioitu histonin ydinproteiiniin H2B:hen, jolloin syntyy H2B-mCherry. Tämä fuusioproteiini ilmentyy pH2B-mCherry-IRES-neo3-plasmidista, ja se toimii kromatiinin merkkiaineena, joka korostaa ydin-DNA:ta elävässä solukuvauksessa ja helpottaa kromatiinin dynamiikan ja ydinarkkitehtuurin tutkimista.

Lisäksi tämä solulinja ilmentää α-tubuliiniin fuusioitunutta monomeerista tehostettua GFP:tä (vihreä fluoresoiva proteiini), joka on tuotu pmEGFP-α-tubuliini-IRES-puro2b-plasmidilla. GFP-α-tubuliinifuusio tuottaa elinvoimaista vihreää fluoresenssia, joka hahmottaa mikrotubulusten rakenteet solussa. Tämä ominaisuus on ratkaisevan tärkeä tutkittaessa mikrotubulusten järjestäytymistä, dynamiikkaa ja niiden roolia solun jakautumisessa ja solunsisäisessä kuljetuksessa. Näiden konstruktioiden vakaa integrointi mahdollistaa näiden solun komponenttien jatkuvan ja pitkäaikaisen havainnoinnin ilman toistuvaa transfektiota, mikä vähentää vaihtelua ja parantaa kokeellisten tulosten luotettavuutta. Transfektion jälkeinen lääkeresistenssivalinta varmistaa ekspression vakauden ja yhdenmukaisuuden tämän linjan solujen välillä.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa