HK EGFP-alfa-tubulinas/H2B-mCherry

HK EGFP-alfa-tubulino/H2B-mCherry HeLa Kyoto ląstelių linija yra kruopščiai sukurtas modelis, skirtas išsamiai vizualizuoti ląstelinius procesus. Ši kloninė linija stabiliai užkrėsta dviem fluorescuojančių baltymų junginiais, kurie leidžia realiuoju laiku matyti chromatiną ir mikrovamzdelių tinklą. Raudonasis fluorescencinis baltymas mCherry sujungtas su pagrindiniu histono baltymu H2B, sukuriant H2B-mCherry. Šis sintezės baltymas išreiškiamas iš pH2B-mCherry-IRES-neo3 plazmidės ir naudojamas kaip chromatino žymeklis, išryškinantis branduolio DNR gyvų ląstelių vaizdavimo metu ir palengvinantis chromatino dinamikos ir branduolio architektūros tyrimus.

Be to, ši ląstelių linija išreiškia monomerinį sustiprintą GFP (žaliąjį fluorescencinį baltymą), sujungtą su α-tubulinu, įvestą per pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b plazmidę. GFP-α-tubulino sintezė suteikia ryškią žalią fluorescenciją, kuri apibrėžia mikrotubulų struktūras ląstelėje. Ši savybė labai svarbi tiriant mikrotubulų organizaciją, dinamiką ir jų vaidmenį ląstelės dalijimuisi bei viduląsteliniam pernešimui. Stabili šių konstruktų integracija leidžia nuolat, ilgą laiką stebėti šiuos ląstelių komponentus be pakartotinės transfekcijos, taip sumažinant kintamumą ir padidinant eksperimentų rezultatų patikimumą. Atsparumo vaistams atranka po transfekcijos užtikrina šios linijos ląstelių raiškos stabilumą ir vienodumą.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime