
- Audinys
- Gimdos kaklelis
- Liga
- Karcinoma
- Sinonimai
- HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b, HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP
Dokumentai
HK EGFP-Kleisin-beta
Cell line · Prekės numeris 300674
The HK EGFP-Kleisin-beta cell line represents a genetically modified variant of Hela Kyoto cells designed primarily for the study of chromosome cohesion d...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- HK EGFP-Kleisin-betaCell line€800.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
HK EGFP-Kleisin-beta ląstelių linija yra genetiškai modifikuota Hela Kyoto ląstelių atmaina, skirta chromosomų sanglaudos ląstelės ciklo metu tyrimams. Šioje ląstelių linijoje ekspresuojamas sustiprintas žaliasis fluorescencinis baltymas (EGFP), sujungtas su Kleisin-beta baltymu - svarbia kohezinų komplekso sudedamąja dalimi, kuri yra gyvybiškai svarbi seserinių chromatidžių sanglaudai. Su EGFP žymėtu Kleisin-beta galima realiuoju laiku vizualizuoti kohezinų dinamiką ir lokalizaciją per visą ląstelės ciklą, taip palengvinant išsamią chromosomų struktūros ir funkcijos analizę ląsteliniame kontekste.
Šis ląstelių modelis paprastai naudojamas atliekant tyrimus, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama mitozės ir mejozės chromosomų segregacijos mechanizmams, ypač siekiant išsiaiškinti, kaip kohezinų reguliavimas veikia genetinį stabilumą ir ląstelių dalijimąsi. Kleisin-beta fluorescencinis žymėjimas leidžia ištirti jo sąveiką su kitais kohezinų komponentais ir chromosomų baltymais, todėl galima suprasti, kaip kohezinas erdvėje ir laike susikaupia ant chromosomų. Šią ląstelių liniją galima naudoti tiriant genetinius sutrikimus ir vėžinius susirgimus, kai kohezinų funkcija yra sutrikusi, todėl ji yra vertinga priemonė, padedanti suprasti patogenezę ir kurti gydymo strategijas.
- Audinys
- Gimdos kaklelis
- Liga
- Karcinoma
- Sinonimai
- HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b
- HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- GMO-S1
- Išsami informacija apie GMO statusą
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-kleisin-beta construct for live-cell studies of cohesin and chromosome architecture. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašios ląstelės su mozaikos formos akmenukais
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- HK EGFP-Kleisin-beta (Cytion katalogo numeris 300674)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1D64
- Indėlininkas
- Ellenbergo laboratorija (EMBL)
05Išraiška ir jautrumas
- Baltojų baltymų ekspresija
- EGFP-Kleisin-β: 589 / Pcmv, 619..645 / Flag-tag, 661..1368 / GFP, 1393..3206 / Kleisin Beta, 4474..5268 KanR/NeoR
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 1 x 104 ląstelės/cm2
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 30 metų
- Etninė priklausomybė
- Afroamerikietis
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Taikomos susitarimai su trečiosiomis šalimis
- Taip
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)