
- Szövet
- Cervix
- Betegség
- Karcinóma
- Szinonimák
- HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b, HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP
Dokumentumok
HK EGFP-Kleisin-beta
Cell line · Termékszám 300674
The HK EGFP-Kleisin-beta cell line represents a genetically modified variant of Hela Kyoto cells designed primarily for the study of chromosome cohesion d...
Személyre szabás / Ajánlások
- HK EGFP-Kleisin-betaCell line€800.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
A HK EGFP-Kleisin-béta sejtvonal a Hela Kyoto sejtek genetikailag módosított változata, amelyet elsősorban a kromoszómák sejtciklus alatti kohéziójának tanulmányozására terveztek. Ez a sejtvonal egy fokozottan zöld fluoreszcens fehérjét (EGFP) expresszál, amelyet a Kleisin-béta fehérjével fuzionáltak, amely a kromatidák kohéziójához nélkülözhetetlen kohézin komplex egyik fontos összetevője. Az EGFP-vel jelölt Kleisin-béta expressziója lehetővé teszi a koheszin dinamikájának és lokalizációjának valós idejű vizualizálását a sejtciklus során, megkönnyítve a kromoszóma szerkezetének és működésének részletes elemzését sejtkörnyezetben.
Ezt a sejtmodellt jellemzően a mitotikus és meiotikus kromoszómaszegregáció mechanizmusaira összpontosító kutatások során használják, különösen azt vizsgálva, hogy a koheszin szabályozása hogyan befolyásolja a genetikai stabilitást és a sejtosztódást. A Kleisin-béta fluoreszcens jelölése lehetővé teszi más kohézin komponensekkel és kromoszómális fehérjékkel való kölcsönhatásának vizsgálatát, betekintést nyújtva a kohézin kromoszómákon való térbeli és időbeli összeszerelődésébe. Ennek a sejtvonalnak a felhasználása kiterjed az olyan genetikai rendellenességek és rákos megbetegedések vizsgálatára, ahol a koheszin működése megzavarodott, értékes eszközt kínálva a patogenezis megértéséhez és terápiás stratégiák kifejlesztéséhez.
- Szövet
- Cervix
- Betegség
- Karcinóma
- Szinonimák
- HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b
- HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Nő
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-S1
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-kleisin-beta construct for live-cell studies of cohesin and chromosome architecture. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű, mozaikos kő alakú sejtek
04Azonosítók
- Hivatkozás
- HK EGFP-Kleisin-béta (Cytion katalógusszám: 300674)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1D64
- Betétes
- Az Ellenberg Labor (EMBL)
05Kifejeződés és fogékonyság
- Fehérjeexpresszió
- EGFP-Kleisin-β: 589 / Pcmv, 619..645 / Flag-tag, 661..1368 / GFP, 1393..3206 / Kleisin-Béta, 4474..5268 KanR/NeoR
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Ültetési sűrűség
- 1 x 104 sejt/cm2
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Az olvadás utáni helyreállás
- Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- 30 év
- Etnikai hovatartozás
- Afroamerikai
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Harmadik felekkel kötött megállapodások érvényesek
- Igen
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)