HK EGFP-Kleisin-beta

Die HK EGFP-Kleisin-beta-Zelllinie ist eine genetisch veränderte Variante der Hela-Kyoto-Zellen, die in erster Linie für die Untersuchung des Chromosomenzusammenhalts während des Zellzyklus entwickelt wurde. Diese Zelllinie exprimiert ein verstärktes grün fluoreszierendes Protein (EGFP), das mit dem Kleisin-beta-Protein fusioniert ist, einer entscheidenden Komponente des Kohäsin-Komplexes, der für den Zusammenhalt der Schwesterchromatiden unerlässlich ist. Die Expression von EGFP-getaggtem Kleisin-beta ermöglicht die Echtzeit-Visualisierung der Cohesin-Dynamik und -Lokalisierung während des gesamten Zellzyklus und erleichtert damit detaillierte Analysen der Chromosomenstruktur und -funktion im zellulären Kontext.

Dieses Zellmodell wird typischerweise in der Forschung eingesetzt, die sich mit den Mechanismen der mitotischen und meiotischen Chromosomentrennung befasst, insbesondere mit der Frage, wie die Regulierung von Kohäsin die genetische Stabilität und die Zellteilung beeinflusst. Die Fluoreszenzmarkierung von Kleisin-beta ermöglicht die Untersuchung seiner Interaktion mit anderen Cohesin-Komponenten und chromosomalen Proteinen, was Einblicke in die räumliche und zeitliche Anordnung von Cohesin auf Chromosomen ermöglicht. Die Verwendung dieser Zelllinie erstreckt sich auf die Untersuchung genetischer Störungen und Krebserkrankungen, bei denen die Kohäsinfunktion gestört ist, und bietet ein wertvolles Instrument für das Verständnis der Pathogenese und die Entwicklung therapeutischer Strategien.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung