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HK EGFP-Kleisin-beta
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HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b, HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP

HK EGFP-Kleisin-beta

Cell line · 제품 번호 300674

The HK EGFP-Kleisin-beta cell line represents a genetically modified variant of Hela Kyoto cells designed primarily for the study of chromosome cohesion d...

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롯
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01일반 정보

설명

HK EGFP-클레이신-베타 세포주는 주로 세포 주기 동안 염색체 응집 연구를 위해 설계된 헬라 교토 세포의 유전자 변형 변종입니다. 이 세포주는 자매 염색체 응집에 필수적인 코헤신 복합체의 중요한 구성 요소인 클라이신-베타 단백질과 융합된 향상된 녹색 형광 단백질(EGFP)을 발현합니다. EGFP 태그가 부착된 클레이신-베타의 발현은 세포 주기 전반에 걸쳐 코헤신 역학 및 국소화를 실시간으로 시각화하여 세포 맥락에서 염색체 구조와 기능에 대한 상세한 분석을 용이하게 합니다.

이 세포 모델은 일반적으로 유사 분열 및 감수 분열 염색체 분리 메커니즘에 초점을 맞춘 연구에 활용되며, 특히 코헤신의 조절이 유전적 안정성과 세포 분열에 어떤 영향을 미치는지 살펴보는 데 사용됩니다. 클레이신-베타의 형광 태깅은 다른 코헤신 성분 및 염색체 단백질과의 상호작용을 조사하여 염색체에서 코헤신의 공간적, 시간적 조립에 대한 통찰력을 제공합니다. 이 세포주의 사용은 코헤신 기능이 중단되는 유전 질환 및 암 연구로 확장되어 발병 기전을 이해하고 치료 전략을 개발하는 데 유용한 도구를 제공합니다.

티슈
자궁경부
질병
암종
동의어
  • HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b
  • HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-kleisin-beta construct for live-cell studies of cohesin and chromosome architecture. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
1

03특징

형태학
모자이크 돌 모양의 상피 유사 세포

04식별자

인용
HK EGFP-클레이신-베타(사이티온 카탈로그 번호 300674)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_1D64
예금자
엘렌버그 연구소(EMBL)

05발현 및 감수성

단백질 발현
EGFP- 클레이신-β: 위치/유전자: 1..589 / Pcmv, 619..645 / 플래그태그, 661.1368 / GFP, 1393..3206 / 클레이신 베타, 4474..5268 KanR/NeoR

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
1 x 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
30년
민족
아프리카계 미국인