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HK Mad2-LAP/H2B-mCherry
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HeLa Kyoto Mad2-LAP and H2B-mCherry, HeLa Kyoto Mad2-LAP

HK Mad2-LAP/H2B-mCherry

Cell line · 제품 번호 300920

The HK Mad2-LAP/H2B-mCherry cell line is a genetically engineered cell model extensively utilized for studying chromosome segregation and the spindle asse...

€800.00세금 및 배송비 별도

사용자 지정 / 추천 사항

재고 있음
롯
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  • CoA
1

01일반 정보

설명

HK Mad2-LAP/H2B-mCherry 세포주는 유사 분열 중 염색체 분리와 스핀들 조립 체크포인트를 연구하는 데 광범위하게 활용되는 유전자 조작 세포 모델입니다. 이 세포는 원래 자궁경부암에서 채취한 강력한 인간 세포주인 HeLa 교토 세포에서 유래했습니다. 세포주의 HK Mad2-LAP(LAP-태그 매드2) 양상은 모든 염색체가 메타파즈 플레이트에서 적절하게 정렬될 때까지 아나파즈 시작을 방지하는 스핀들 조립 체크포인트의 핵심 구성 요소인 매드2 단백질의 시각화 및 기능 분석을 용이하게 해줍니다.

히스톤 H2B에 mCherry 형광 단백질이 태그된 H2B-mCherry를 통합하면 세포 분열 중 염색질 역학을 실시간으로 이미징할 수 있습니다. 이러한 특징 덕분에 HK Mad2-LAP/H2B-mCherry 세포주는 다양한 실험 조건에서 인간 세포의 염색체 움직임과 유사 분열 진행을 관찰하기 위한 고해상도 라이브 세포 이미징 기술에 탁월한 도구입니다. 형광 태그를 사용하면 정밀한 추적과 정량화가 가능하므로 세포 주기 조절과 염색체 안정성을 관장하는 분자 메커니즘에 대한 귀중한 통찰력을 얻을 수 있습니다.

티슈
자궁경부
질병
암종
동의어
  • HeLa Kyoto Mad2-LAP and H2B-mCherry
  • HeLa Kyoto Mad2-LAP

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains Mad2-LAP and H2B-mCherry constructs enabling visualization of spindle checkpoint dynamics. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
1

03특징

형태학
모자이크 돌 모양의 상피 유사 세포

04식별자

인용
HK Mad2-LAP/H2B-mCherry(사이티온 카탈로그 번호 300920)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_1D65
예금자
엘렌버그 연구소(EMBL)

05발현 및 감수성

단백질 발현
Mad2-LAP/H2B-mCherry

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
1 x 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
30년
민족
아프리카계 미국인