HK Mad2-LAP/H2B-mCherry

HK Mad2-LAP/H2B-mCherry-cellelinjen er en genmodifisert cellemodell som er mye brukt til å studere kromosomsegregering og kontrollpunktet for spindelmontering under mitose. Disse cellene er avledet fra HeLa Kyoto-celler, en robust human cellelinje som opprinnelig stammer fra livmorhalskreft. HK Mad2-LAP (LAP-tagged Mad2) i cellelinjen gjør det lettere å visualisere og analysere Mad2-proteinet, en kritisk komponent i spindelmonteringskontrollen som forhindrer at anafasen starter før alle kromosomene er riktig justert ved metafaseplaten.

Inkorporering av H2B-mCherry, der histon H2B er merket med det fluorescerende proteinet mCherry, gjør det mulig å avbilde kromatindynamikken i sanntid under celledeling. Denne egenskapen gjør HK Mad2-LAP/H2B-mCherry-cellelinjen til et utmerket verktøy for høyoppløselige avbildningsteknikker i levende celler for å observere kromosombevegelser og mitotisk progresjon i humane celler under ulike eksperimentelle forhold. Bruken av fluorescerende merker bidrar til presis sporing og kvantifisering, og gir dermed verdifull innsikt i de molekylære mekanismene som styrer cellesyklusregulering og kromosomstabilitet.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring