HK Mad2-LAP/H2B-mCherry

Celična linija HK Mad2-LAP/H2B-mCherry je gensko spremenjen celični model, ki se pogosto uporablja za preučevanje segregacije kromosomov in kontrolne točke sestavljanja vretena med mitozo. Te celice so pridobljene iz celic HeLa Kyoto, robustne človeške celične linije, ki je bila prvotno vzeta iz karcinoma materničnega vratu. Vidik celične linije HK Mad2-LAP (Mad2 z oznako LAP) omogoča vizualizacijo in funkcionalno analizo beljakovine Mad2, ki je kritična sestavina kontrolne točke sestavljanja vretena, ki preprečuje začetek anafaza, dokler niso vsi kromosomi pravilno poravnani na ploščici metafaza.

Vključitev H2B-mCherry, kjer je histon H2B označen s fluorescenčnim proteinom mCherry, omogoča slikanje dinamike kromatina med delitvijo celic v realnem času. Zaradi te lastnosti je celična linija HK Mad2-LAP/H2B-mCherry odlično orodje za tehnike slikanja v živo z visoko ločljivostjo za opazovanje gibanja kromosomov in mitotičnega napredovanja v človeških celicah pod različnimi eksperimentalnimi pogoji. Uporaba fluorescenčnih oznak pomaga pri natančnem sledenju in kvantifikaciji ter tako zagotavlja dragocen vpogled v molekularne mehanizme, ki uravnavajo celični cikel in kromosomsko stabilnost.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo