HK Mad2-LAP/H2B-mCherry

HK Mad2-LAP/H2B-mCherry rakuliin on geneetiliselt muundatud rakumudel, mida kasutatakse laialdaselt kromosoomide segregatsiooni ja spindli kokkupaneku kontrollpunkti uurimiseks mitoosi ajal. Need rakud on saadud HeLa Kyoto rakkudest, mis on algselt emakakaela kartsinoomist võetud tugev inimrakkude liin. Rakuliini HK Mad2-LAP (LAP-märgistatud Mad2) aspekt hõlbustab Mad2 valgu, spindli kokkupaneku kontrollpunkti kriitilise komponendi, mis takistab anafaasi algust, kuni kõik kromosoomid on metafaasiplaadil korralikult joondunud, visualiseerimist ja funktsionaalset analüüsi.

H2B-mCherry lisamine, kus histoon H2B on märgistatud mCherry fluorestseeruva valguga, võimaldab kromatiini dünaamika kujutamist reaalajas raku jagunemise ajal. See omadus muudab HK Mad2-LAP/H2B-mCherry rakuliini suurepäraseks vahendiks kõrge resolutsiooniga elusraku pildistamismeetodite jaoks, et jälgida kromosoomide liikumist ja mitoosi kulgu inimrakkudes erinevates katsetingimustes. Fluorestseeruvate märgiste kasutamine aitab kaasa täpsele jälgimisele ja kvantifitseerimisele, andes seeläbi väärtuslikke teadmisi rakutsükli reguleerimise ja kromosoomide stabiilsuse molekulaarsetest mehhanismidest.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest