HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry rakuliin on Hela Kyotost saadud in vitro mudel, mis on loodud kromatiini dünaamika ja tuumaarhitektuuri reaalajas visualiseerimiseks elusrakkudes. See rakuliin ekspresseerib kahte fluorestseeruva valgu fusiooni: EGFP (tugevdatud roheline fluorestseeruv valk), mis on fusioonis Lamin B1-ga, ja mCherry (punane fluorestseeruv valk), mis on fusioonis histoon H2B-ga. EGFP fusioon Lamin B1-ga võimaldab jälgida tuumakesta ja tuumalamiini - tuuma terviklikkuse ja funktsionaalsuse säilitamise seisukohalt olulisi struktuure. Lamiinivalgud on V-tüüpi vahepealsed filamentvalgud, mis moodustavad tuuma sisemise membraani all oleva võrgustiku, millel on oluline roll tuuma stabiilsuses, kromatiini korralduses ja geenide regulatsioonis.

Teisalt võimaldab mCherry-märgistatud histoon H2B visualiseerida kromatiini tuuma sees. Histoonid on nukleosoomi põhikomponendid, mis osalevad DNA kromatiini organiseerimises, mistõttu on nad otsustava tähtsusega DNA replikatsiooni, parandamise ja transkriptsiooni jaoks. H2B-l olev mCherry märgistus annab elavat punast fluorestsentsi, mis vastandub EGFP rohelisele fluorestsentsile, võimaldades samaaegselt tuumastruktuuri ja kromatiini kahekordset pildistamist elusraku katsetes. Seda rakuliini kasutatakse tavaliselt uuringutes, mis keskenduvad tuumamehaanikale, mitoosile ja genoomi stabiilsusele, andes dünaamilise ülevaate rakulistest protsessidest, mida on muidu raske reaalajas jälgida.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest