HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry細胞株は、生きた細胞におけるクロマチンダイナミクスと核構造をリアルタイムで可視化するためにデザインされたHela京都由来のin vitroモデルである。この細胞株は2つの蛍光タンパク質融合体を発現する：EGFP（増強型緑色蛍光タンパク質）はラミンB1と融合し、mCherry（赤色蛍光タンパク質）はヒストンH2Bと融合している。EGFPとラミンB1の融合により、核の完全性と機能を維持するために重要な構造である核膜と核ラミナの観察が可能になる。ラミンタンパク質はV型中間フィラメントタンパク質で、核内膜の下に網目構造を形成し、核の安定性、クロマチン組織化、遺伝子制御に重要な役割を果たしている。

一方、mCherryタグの付いたヒストンH2Bは、核内のクロマチンの可視化を可能にする。ヒストンはヌクレオソームの基本的な構成要素であり、DNAのクロマチンへの組織化に関与し、DNAの複製、修復、転写に極めて重要である。H2B上のmCherryタグは、EGFPの緑色蛍光と対照的な鮮やかな赤色蛍光を示し、ライブセル実験において核構造とクロマチンの同時二重イメージングを可能にする。この細胞株は、核の力学、有糸分裂、ゲノムの安定性に焦点を当てた研究で一般的に使用されており、リアルタイムで観察することが難しい細胞プロセスの動的なビューを提供している。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。