HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

Dòng tế bào HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry là một mô hình in vitro được phát triển từ dòng tế bào Hela Kyoto, được thiết kế để quan sát trực tiếp động học của chromatin và cấu trúc nhân trong tế bào sống. Dòng tế bào này biểu hiện hai protein huỳnh quang ghép: EGFP (protein huỳnh quang xanh lá cây tăng cường) ghép với Lamin B1, và mCherry (protein huỳnh quang đỏ) ghép với histone H2B. Sự kết hợp của EGFP với Lamin B1 cho phép quan sát màng nhân và lớp lamina nhân, các cấu trúc quan trọng trong việc duy trì tính toàn vẹn và chức năng của nhân. Các protein Lamin là protein sợi trung gian loại V, tạo thành một mạng lưới nằm dưới màng nhân trong, đóng vai trò quan trọng trong sự ổn định của nhân, tổ chức chromatin và điều hòa gen.

Mặt khác, histone H2B được gắn mCherry cho phép quan sát chromatin bên trong nhân. Histones là thành phần cơ bản của nucleosome, tham gia vào việc tổ chức DNA thành chromatin, do đó chúng rất quan trọng đối với quá trình sao chép, sửa chữa và phiên mã DNA. Thẻ mCherry trên H2B cung cấp ánh sáng huỳnh quang đỏ rực rỡ, tương phản với ánh sáng huỳnh quang xanh của EGFP, cho phép quan sát đồng thời cấu trúc nhân và chromatin trong các thí nghiệm tế bào sống. Dòng tế bào này thường được sử dụng trong các nghiên cứu tập trung vào cơ chế nhân, phân bào và ổn định bộ gen, cung cấp cái nhìn động về các quá trình tế bào vốn khó quan sát trong thời gian thực.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.