HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry
Cell line · 제품 번호 300919
HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry 세포주는 염색질 역학 및 핵 내...의 실시간 시각화를 위해 설계된, HeLa Kyoto에서 유래한 체외 모델입니다.
사용자 지정 / 추천 사항
- HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherryCell line€800.00
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01일반 정보
- 설명
HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry 세포주는 살아있는 세포의 염색질 역학 및 핵 구조를 실시간으로 시각화하도록 설계된 헬라 교토 유래 체외 모델입니다. 이 세포주는 두 개의 형광 단백질 융합을 발현합니다: 라민 B1과 융합된 EGFP(강화된 녹색 형광 단백질)와 히스톤 H2B와 융합된 mCherry(적색 형광 단백질)입니다. EGFP와 라민 B1의 융합을 통해 핵의 무결성과 기능을 유지하는 데 중요한 구조인 핵 외피와 핵 층을 관찰할 수 있습니다. 라민 단백질은 핵막 내부의 그물망을 형성하는 V형 중간 필라멘트 단백질로 핵의 안정성, 염색질 조직 및 유전자 조절에 핵심적인 역할을 합니다.
반면, mCherry 태그 히스톤 H2B는 핵 내 염색질을 시각화할 수 있게 해줍니다. 히스톤은 DNA가 염색질로 조직되는 데 관여하는 핵의 기본 구성 요소로, DNA 복제, 복구 및 전사에 중요한 역할을 합니다. H2B의 mCherry 태그는 EGFP의 녹색 형광과 대조되는 선명한 빨간색 형광을 제공하여 살아있는 세포 실험에서 핵 구조와 염색질을 동시에 이중 이미징할 수 있습니다. 이 세포주는 핵 역학, 유사 분열 및 게놈 안정성에 초점을 맞춘 연구에 일반적으로 사용되며, 다른 방법으로는 실시간으로 관찰하기 어려운 세포 과정을 동적으로 볼 수 있습니다.
- 티슈
- 자궁경부
- 질병
- 암종
- 전이 부위
- 원발 종양 부위 (자궁경부)
- 응용 분야
- 핵 라미나 및 염색질 조직화; 라민 B1의 동역학; H2B 염색질 영상화; 이중 색상 생세포 형광; 핵 역학; 유사분열; 게놈 안정성; 핵막 생물학
- 동의어
- HeLa Kyoto EGFP-LaminB1 and H2B-mCherry
02분류
- 생물체
- 인간
- 성
- 여성
- 성장 특성
- 준수자
- 유전자 변형 여부
- GMO-S1
- 유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains EGFP-Lamin B1 and H2B-mCherry constructs for imaging nuclear envelope and chromatin organization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- 생물안전 등급
- 1
03특징
- 형태학
- 모자이크 돌 모양의 상피 유사 세포
- 세포 유형
- 상피 세포
04식별자
- 인용
- HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry(사이티온 카탈로그 번호 300919)
- NCBI 세금 식별번호
- 9606
- 셀로사우루스
- CVCL_UR41
- 예금자
- 엘렌버그 연구소(EMBL)
05발현 및 감수성
- 단백질 발현
- EGFP-LaminB1/H2B-mCherry
- 제품
- 히스톤 H2B
06취급 및 배양
- 배지
- DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
- 배양 조건
37°C, 5%CO2, 습한 대기.
- 건강보조식품
- 10% FBS로 배지를 보충합니다
- 분리 시약
- 아큐타제
- 재배양
- 부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
- 파종 밀도
- 1 x 10⁴ 세포/cm²
- 유체 교체
- 주 2~3회
- 해동 후 회복
- 해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
- 해동 및 배양
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07품질 관리 및 냉동 보존
- 불임
마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.
박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.
- 배양액 동결
- 냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
- 보관 조건
장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.
- 배송 조건
냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.
08기부자
- 기증자 연령
- 30년
- 민족
- 아프리카계 미국인
09법률 및 안전
- 안전 수칙
- 향후 해동을 위해 액체 질소에 냉동 보관을 계획하는 경우, 엄격한 안전 조치를 준수해야 합니다. 적절한 보호 장갑과 의복은 필수이며, 액체 질소 탱크로 냉동 샘플을 옮길 때는 반드시 안면 마스크나 보안경을 착용해야 합니다. 이는 제거 시 날카로운 파편이 튀어나올 수 있는 극저온 폭발로 인한 부상 위험을 줄이기 위한 것입니다.
- 보증
싸이티온은 제품의 품질과 생존력을 보증합니다. 당사는 당사 시설에서 배송된 후 60일 동안 배양 시작 시 세포가 생존할 수 있음을 보증합니다. 당사는 모든 재료가 분석 증명서 및/또는 제품 시트에 설명된 사양을 준수함을 보증합니다
자세한 내용은 <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">보증서 를 참조하시기 바랍니다
- 제3자 계약이 적용됩니다
- 네
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