HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

Linia komórkowa HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry jest modelem in vitro pochodzącym z Hela Kyoto, zaprojektowanym do wizualizacji w czasie rzeczywistym dynamiki chromatyny i architektury jądrowej w żywych komórkach. Ta linia komórkowa wyraża dwie fuzje białek fluorescencyjnych: EGFP (wzmocnione zielone białko fluorescencyjne) połączone z laminą B1 i mCherry (czerwone białko fluorescencyjne) połączone z histonem H2B. Fuzja EGFP z Laminą B1 pozwala na obserwację otoczki jądrowej i blaszki jądrowej, struktur krytycznych dla utrzymania integralności i funkcjonalności jądra. Białka laminy są białkami włókien pośrednich typu V, które tworzą siatkę leżącą pod wewnętrzną błoną jądrową, odgrywając kluczową rolę w stabilności jądra, organizacji chromatyny i regulacji genów.

Z drugiej strony, histon H2B znakowany mCherry umożliwia wizualizację chromatyny w jądrze. Histony są podstawowymi składnikami nukleosomu, zaangażowanymi w organizację DNA w chromatynę, co czyni je kluczowymi dla replikacji, naprawy i transkrypcji DNA. Znacznik mCherry na H2B zapewnia żywą czerwoną fluorescencję, która kontrastuje z zieloną fluorescencją EGFP, umożliwiając jednoczesne podwójne obrazowanie struktury jądrowej i chromatyny w eksperymentach na żywych komórkach. Ta linia komórkowa jest powszechnie stosowana w badaniach skupiających się na mechanice jądrowej, mitozie i stabilności genomu, zapewniając dynamiczny obraz procesów komórkowych, które w przeciwnym razie są trudne do zaobserwowania w czasie rzeczywistym.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym