HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

La linea cellulare HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry è un modello in vitro derivato da Hela Kyoto, progettato per la visualizzazione in tempo reale della dinamica della cromatina e dell'architettura nucleare nelle cellule viventi. Questa linea cellulare esprime due fusioni di proteine fluorescenti: EGFP (enhanced green fluorescent protein) fusa con la Lamin B1 e mCherry (una proteina fluorescente rossa) fusa con l'istone H2B. La fusione di EGFP con Lamin B1 consente di osservare l'involucro nucleare e la lamina nucleare, strutture fondamentali per mantenere l'integrità e la funzionalità del nucleo. Le proteine della lamina sono proteine del filamento intermedio di tipo V che formano un reticolo alla base della membrana nucleare interna, svolgendo ruoli chiave nella stabilità nucleare, nell'organizzazione della cromatina e nella regolazione genica.

D'altra parte, l'istone H2B marcato con mCherry consente di visualizzare la cromatina all'interno del nucleo. Gli istoni sono componenti fondamentali del nucleosoma, coinvolti nell'organizzazione del DNA nella cromatina e quindi cruciali per la replicazione, la riparazione e la trascrizione del DNA. Il tag mCherry su H2B fornisce una fluorescenza rossa vivida che contrasta con la fluorescenza verde di EGFP, consentendo una doppia immagine simultanea della struttura nucleare e della cromatina negli esperimenti in vivo. Questa linea cellulare è comunemente utilizzata in studi incentrati sulla meccanica nucleare, sulla mitosi e sulla stabilità del genoma, fornendo una visione dinamica dei processi cellulari che sono altrimenti difficili da osservare in tempo reale.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia