HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

La linea cellulare HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry è un modello cellulare geneticamente modificato derivato da Hela Kyoto, sviluppato per facilitare studi avanzati sulla dinamica nucleare e sull'organizzazione della cromatina all'interno delle cellule viventi. Questa linea cellulare esprime due proteine di fusione: EGFP (proteina fluorescente verde potenziata) fusa con la Lamina A e mCherry (proteina fluorescente rossa) fusa con l'istone H2B. La fusione EGFP-Lamina A evidenzia l'involucro nucleare e consente di visualizzare i cambiamenti dell'architettura nucleare durante la progressione del ciclo cellulare o in varie condizioni sperimentali. Nel frattempo, la proteina di fusione H2B-mCherry si lega al DNA e fornisce una vivida fluorescenza rossa che contrassegna la cromatina, consentendo l'osservazione in tempo reale dei processi cromosomici durante la mitosi e l'interfase.

Queste cellule sono preziose per le applicazioni di imaging in tempo reale, compresi gli studi sull'integrità nucleare, la replicazione del DNA e l'invecchiamento cellulare, nonché per la ricerca sulle malattie in cui l'architettura nucleare è disturbata, come il cancro e le laminopatie. La fluorescenza a doppio colore di questa linea cellulare consente la visualizzazione simultanea dell'involucro nucleare e della cromatina, facilitando una comprensione completa delle interazioni tra nucleo e citoplasma e dell'organizzazione spazio-temporale della cromatina. Tali capacità ne fanno uno strumento fondamentale per la ricerca in biologia molecolare e biofisica cellulare, fornendo approfondimenti sui meccanismi di regolazione dell'espressione genica, sull'organizzazione nucleare e sul ciclo cellulare.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia