HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry-cellelinjen er en genetisk manipuleret Hela Kyoto-afledt cellemodel, der er udviklet til at lette avancerede undersøgelser af kernedynamik og kromatinorganisation i levende celler. Denne cellelinje udtrykker to fusionsproteiner: EGFP (forstærket grønt fluorescerende protein) fusioneret med Lamin A og mCherry (et rødt fluorescerende protein) fusioneret med Histone H2B. EGFP-Lamin A-fusionen fremhæver kernekappen og gør det muligt at visualisere ændringer i kernearkitekturen under cellecyklusprogression eller under forskellige eksperimentelle forhold. I mellemtiden binder H2B-mCherry-fusionsproteinet til DNA og giver en levende rød fluorescens, der markerer kromatin, hvilket muliggør observation i realtid af kromosomale processer under mitose og interfase.

Disse celler er uvurderlige i forbindelse med billeddannelse i realtid, herunder undersøgelser af nuklear integritet, DNA-replikation og cellulær aldring samt forskning i sygdomme, hvor den nukleare arkitektur er forstyrret, såsom kræft og laminopatier. Den tofarvede fluorescensfunktion i denne cellelinje giver mulighed for samtidig visualisering af både kernekappen og kromatin, hvilket letter en omfattende forståelse af interaktioner mellem kerne og cytoplasma og den spatiotemporale organisering af kromatin. Disse egenskaber gør den til et vigtigt værktøj for molekylærbiologisk forskning og cellulær biofysik, der giver indsigt i mekanikken bag regulering af genekspression, nuklear organisering og cellecyklus.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring