HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

Η κυτταρική σειρά HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry είναι ένα γενετικά τροποποιημένο κυτταρικό μοντέλο που προέρχεται από το Hela Kyoto και αναπτύχθηκε για να διευκολύνει προηγμένες μελέτες στην πυρηνική δυναμική και την οργάνωση της χρωματίνης μέσα σε ζωντανά κύτταρα. Αυτή η κυτταρική σειρά εκφράζει δύο πρωτεΐνες σύντηξης: (ενισχυμένη πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη) συγχωνευμένη με Lamin A και mCherry (κόκκινη φθορίζουσα πρωτεΐνη) συγχωνευμένη με ιστόνη H2B. Η σύντηξη EGFP-Lamin A αναδεικνύει το πυρηνικό περίβλημα και επιτρέπει την απεικόνιση των αλλαγών της πυρηνικής αρχιτεκτονικής κατά την εξέλιξη του κυτταρικού κύκλου ή υπό διάφορες πειραματικές συνθήκες. Εν τω μεταξύ, η πρωτεΐνη σύντηξης H2B-mCherry συνδέεται με το DNA και παρέχει έναν έντονο κόκκινο φθορισμό που επισημαίνει τη χρωματίνη, επιτρέποντας την παρατήρηση σε πραγματικό χρόνο των χρωμοσωμικών διεργασιών κατά τη μίτωση και τη μεσοφάση.

Τα κύτταρα αυτά είναι ανεκτίμητα για εφαρμογές απεικόνισης σε πραγματικό χρόνο, συμπεριλαμβανομένων μελετών σχετικά με την πυρηνική ακεραιότητα, την αντιγραφή του DNA και την κυτταρική γήρανση, καθώς και για την έρευνα ασθενειών όπου η πυρηνική αρχιτεκτονική διαταράσσεται, όπως ο καρκίνος και οι λαμινοπάθειες. Το χαρακτηριστικό φθορισμού διπλού χρώματος αυτής της κυτταρικής σειράς επιτρέπει την ταυτόχρονη απεικόνιση τόσο του πυρηνικού περιβλήματος όσο και της χρωματίνης, διευκολύνοντας τη συνολική κατανόηση των πυρηνικών-κυτταροπλασματικών αλληλεπιδράσεων και της χωροχρονικής οργάνωσης της χρωματίνης. Οι δυνατότητες αυτές την καθιστούν ένα κρίσιμο εργαλείο για την έρευνα της μοριακής βιολογίας και της κυτταρικής βιοφυσικής, παρέχοντας γνώσεις σχετικά με τη μηχανική της ρύθμισης της γονιδιακής έκφρασης, της πυρηνικής οργάνωσης και του κυτταρικού κύκλου.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης