HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry hücre hattı, canlı hücrelerdeki nükleer dinamikler ve kromatin organizasyonunda ileri çalışmaları kolaylaştırmak için geliştirilmiş genetik olarak tasarlanmış Hela Kyoto türevi bir hücre modelidir. Bu hücre hattı iki füzyon proteini ifade eder: Lamin A ile kaynaşmış EGFP (gelişmiş yeşil floresan protein) ve Histon H2B ile kaynaşmış mCherry (kırmızı floresan protein). EGFP-Lamin A füzyonu nükleer zarfı vurgular ve hücre döngüsü ilerlemesi sırasında veya çeşitli deneysel koşullar altında nükleer mimari değişikliklerinin görselleştirilmesine olanak tanır. Bu arada, H2B-mCherry füzyon proteini DNA'ya bağlanır ve kromatini işaretleyen canlı bir kırmızı floresan sağlayarak mitoz ve interfaz sırasında kromozomal süreçlerin gerçek zamanlı olarak gözlemlenmesini sağlar.

Bu hücreler, nükleer bütünlük, DNA replikasyonu ve hücresel yaşlanma çalışmalarının yanı sıra kanser ve laminopatiler gibi nükleer mimarinin bozulduğu hastalıklarla ilgili araştırmalar da dahil olmak üzere gerçek zamanlı görüntüleme uygulamaları için çok değerlidir. Bu hücre hattının çift renkli floresan özelliği, hem nükleer zarfın hem de kromatinin aynı anda görüntülenmesini sağlayarak nükleer-sitoplazmik etkileşimlerin ve kromatinin uzamsal-zamansal organizasyonunun kapsamlı bir şekilde anlaşılmasını kolaylaştırır. Bu tür yetenekler onu moleküler biyoloji araştırmaları ve hücresel biyofizik için kritik bir araç haline getirerek gen ekspresyonu düzenlemesi, nükleer organizasyon ve hücre döngüsü mekaniği hakkında içgörüler sağlar.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın