HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

Die HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry-Zelllinie ist ein gentechnisch verändertes, von Hela Kyoto abgeleitetes Zellmodell, das entwickelt wurde, um fortgeschrittene Studien zur Kerndynamik und Chromatinorganisation in lebenden Zellen zu ermöglichen. Diese Zelllinie exprimiert zwei Fusionsproteine: EGFP (verstärktes grün fluoreszierendes Protein), das mit Lamin A fusioniert ist, und mCherry (ein rot fluoreszierendes Protein), das mit Histon H2B fusioniert ist. Die EGFP-Lamin A-Fusion hebt die Kernhülle hervor und ermöglicht die Visualisierung von Veränderungen der Kernarchitektur während des Zellzyklus oder unter verschiedenen Versuchsbedingungen. Das H2B-mCherry-Fusionsprotein hingegen bindet an die DNA und sorgt für eine lebhafte rote Fluoreszenz, die das Chromatin markiert und die Beobachtung chromosomaler Prozesse während der Mitose und der Interphase in Echtzeit ermöglicht.

Diese Zellen sind von unschätzbarem Wert für Echtzeit-Bildgebungsanwendungen, einschließlich Studien über die Unversehrtheit des Kerns, die DNA-Replikation und die Zellalterung, sowie für die Erforschung von Krankheiten, bei denen die Kernarchitektur gestört ist, wie Krebs und Laminopathien. Die zweifarbige Fluoreszenz dieser Zelllinie ermöglicht die gleichzeitige Visualisierung der Kernhülle und des Chromatins, was ein umfassendes Verständnis der Wechselwirkungen zwischen Kern und Zytoplasma sowie der räumlichen und zeitlichen Organisation des Chromatins ermöglicht. Diese Fähigkeiten machen sie zu einem wichtigen Werkzeug für die molekularbiologische Forschung und die zelluläre Biophysik, das Einblicke in die Mechanismen der Genexpressionsregulation, der Kernorganisation und des Zellzyklus ermöglicht.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung