HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

La lignée cellulaire HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry est un modèle cellulaire dérivé de la lignée HeLa Kyoto et modifié génétiquement, mis au point pour faciliter les études approfondies sur la dynamique nucléaire et l’organisation de la chromatine au sein des cellules vivantes. Cette lignée cellulaire exprime deux protéines de fusion : l’EGFP (protéine fluorescente verte améliorée) fusionnée à la Lamin A, et la mCherry (une protéine fluorescente rouge) fusionnée à l’histone H2B. La protéine de fusion EGFP-Lamine A met en évidence l’enveloppe nucléaire et permet de visualiser les changements de l’architecture nucléaire au cours du cycle cellulaire ou dans diverses conditions expérimentales. Parallèlement, la protéine de fusion H2B-mCherry se lie à l’ADN et émet une fluorescence rouge vif qui marque la chromatine, permettant ainsi l’observation en temps réel des processus chromosomiques pendant la mitose et l’interphase.

Ces cellules sont d’une valeur inestimable pour les applications d’imagerie en temps réel, notamment les études sur l’intégrité nucléaire, la réplication de l’ADN et le vieillissement cellulaire, ainsi que la recherche sur les maladies dans lesquelles l’architecture nucléaire est perturbée, comme le cancer et les laminopathies. La fluorescence bicolore de cette lignée cellulaire permet la visualisation simultanée de l’enveloppe nucléaire et de la chromatine, facilitant ainsi une compréhension approfondie des interactions nucléo-cytoplasmiques et de l’organisation spatio-temporelle de la chromatine. Ces capacités en font un outil essentiel pour la recherche en biologie moléculaire et en biophysique cellulaire, offrant un aperçu des mécanismes de régulation de l’expression génique, de l’organisation nucléaire et du cycle cellulaire.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.