コンテンツへスキップ
HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry
ティッシュ
子宮頸部
病気
癌腫
同義語
HeLa Kyoto EGFP-LaminA and H2B-mCherry

HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

Cell line · 製品番号 300921

The HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry cell line is a genetically engineered Hela Kyoto derived cell model developed to facilitate advanced studies in nuclear dyn...

€800.00税・送料別
在庫あり
ロット
おすすめ(最も新しいロット)
  • CoA
  • CoA
1

01概要

説明

HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry細胞株は、生きた細胞内での核の動態とクロマチン組織の高度な研究を促進するために開発された、遺伝子操作されたHela京都由来の細胞モデルである。この細胞株は2つの融合タンパク質を発現する:EGFP(増強型緑色蛍光タンパク質)はラミンAと融合し、mCherry(赤色蛍光タンパク質)はヒストンH2Bと融合している。EGFP-ラミンA融合タンパク質は核膜を強調し、細胞周期の進行中や様々な実験条件下での核構造の変化を可視化することができる。一方、H2B-mCherry融合タンパク質はDNAに結合し、クロマチンをマークする鮮やかな赤色蛍光を提供するため、有糸分裂や間期の染色体プロセスをリアルタイムで観察することができる。

これらの細胞は、核の完全性、DNA複製、細胞の老化に関する研究や、癌やラミノパチーのような核の構造が破壊される疾患の研究など、リアルタイムのイメージングアプリケーションにとって非常に貴重である。この細胞株の2色蛍光機能は、核膜とクロマチンの両方を同時に可視化することを可能にし、核-細胞質相互作用とクロマチンの時空間的組織化の包括的理解を促進する。このような機能により、この細胞株は分子生物学研究および細胞生物物理学にとって重要なツールとなり、遺伝子発現制御、核組織化、細胞周期のメカニズムに関する洞察を提供する。

ティッシュ
子宮頸部
病気
癌腫
同義語
  • HeLa Kyoto EGFP-LaminA and H2B-mCherry

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains EGFP-Lamin A and H2B-mCherry constructs enabling dual-color imaging of nuclear lamina and chromatin. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
モザイク状の石の形をした上皮様細胞

04識別子

引用
HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry (Cytion カタログ番号 300921)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1D62
預金者
エレンバーグ・ラボ(EMBL)

05発現と感受性

タンパク質の発現
EGFP-LaminA/H2B-mCherry
製品
ヒストンH2B

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
30年
民族
アフリカ系アメリカ人