HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

La línea celular HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry es un modelo celular derivado de la línea Hela Kyoto y modificado genéticamente, desarrollado para facilitar estudios avanzados sobre la dinámica nuclear y la organización de la cromatina en células vivas. Esta línea celular expresa dos proteínas de fusión: EGFP (proteína fluorescente verde mejorada) fusionada con Lamin A, y mCherry (una proteína fluorescente roja) fusionada con la histona H2B. La fusión EGFP-Lamin A resalta la envoltura nuclear y permite visualizar los cambios en la arquitectura nuclear durante la progresión del ciclo celular o bajo diversas condiciones experimentales. Por su parte, la proteína de fusión H2B-mCherry se une al ADN y proporciona una fluorescencia roja intensa que marca la cromatina, lo que permite la observación en tiempo real de los procesos cromosómicos durante la mitosis y la interfase.

Estas células son de un valor incalculable para aplicaciones de imágenes en tiempo real, incluyendo estudios sobre la integridad nuclear, la replicación del ADN y el envejecimiento celular, así como la investigación de enfermedades en las que se altera la arquitectura nuclear, como el cáncer y las laminopatías. La característica de fluorescencia de dos colores de esta línea celular permite la visualización simultánea tanto de la envoltura nuclear como de la cromatina, lo que facilita una comprensión integral de las interacciones nucleocitoplasmáticas y la organización espacio-temporal de la cromatina. Estas capacidades la convierten en una herramienta fundamental para la investigación en biología molecular y biofísica celular, ya que brinda información sobre los mecanismos de regulación de la expresión génica, la organización nuclear y el ciclo celular.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.