HK Mad2-LAP/H2B-mCherry

La línea celular HK Mad2-LAP/H2B-mCherry es un modelo celular modificado genéticamente que se utiliza ampliamente para estudiar la segregación cromosómica y el punto de control del ensamblaje del huso durante la mitosis. Estas células se derivan de las células HeLa Kyoto, una línea celular humana robusta obtenida originalmente de un carcinoma cervical. La característica HK Mad2-LAP (Mad2 marcada con LAP) de la línea celular facilita la visualización y el análisis funcional de la proteína Mad2, un componente crítico del punto de control del ensamblaje del huso que impide el inicio de la anafase hasta que todos los cromosomas estén correctamente alineados en la placa metafásica.

La incorporación de H2B-mCherry, en la que la histona H2B está marcada con la proteína fluorescente mCherry, permite la obtención de imágenes en tiempo real de la dinámica de la cromatina durante la división celular. Esta característica convierte a la línea celular HK Mad2-LAP/H2B-mCherry en una excelente herramienta para técnicas de imágenes de células vivas de alta resolución, con el fin de observar los movimientos cromosómicos y la progresión mitótica en células humanas bajo diversas condiciones experimentales. El uso de marcadores fluorescentes facilita el seguimiento y la cuantificación precisos, lo que brinda información valiosa sobre los mecanismos moleculares que rigen la regulación del ciclo celular y la estabilidad cromosómica.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.