HK Mad2-LAP/H2B-mCherry

HK Mad2-LAP/H2B-mCherry-cellelinjen er en genetisk konstrueret cellemodel, der i vid udstrækning bruges til at studere kromosomadskillelse og spindelsamlingens kontrolpunkt under mitose. Disse celler stammer fra HeLa Kyoto-celler, en robust menneskelig cellelinje, der oprindeligt er taget fra et livmoderhalskræftkarcinom. HK Mad2-LAP (LAP-tagged Mad2) aspektet af cellelinjen letter visualiseringen og den funktionelle analyse af Mad2-proteinet, en kritisk komponent i spindelsamlingens kontrolpunkt, der forhindrer anafasens begyndelse, indtil alle kromosomer er korrekt justeret på metafasepladen.

Inkorporering af H2B-mCherry, hvor histon H2B er mærket med det fluorescerende protein mCherry, giver mulighed for realtidsbilleder af kromatindynamik under celledeling. Denne funktion gør HK Mad2-LAP/H2B-mCherry-cellelinjen til et fremragende værktøj til live-celle-billeddannelsesteknikker med høj opløsning til at observere kromosombevægelser og mitotisk progression i humane celler under forskellige eksperimentelle forhold. Brugen af fluorescerende tags hjælper med præcis sporing og kvantificering og giver dermed værdifuld indsigt i de molekylære mekanismer, der styrer cellecyklusregulering og kromosomstabilitet.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring